10.3969/j.issn.1006-7248.2004.02.015
人牙胚釉原蛋白成熟肽基因的克隆
目的:克隆人釉原蛋白成熟肽编码区基因片断,并构建含有该基因的重组表达质粒.方法:从引产胎儿牙胚组织中抽提总RNA,以Oligo(dt)为引物,逆转录合成牙胚cDNA利用PCR,从cDNA中扩增出人釉原蛋白成熟肽编码序列(约540bp),所得目的基因片断插入表达载体质粒PQE30,转化到大肠杆菌DH5α后挑选阳性克隆,抽提重组质粒DNA,通过PCR、酶切和核苷酸序列分析,鉴定阳性克隆.结果:样品质粒测序证实,质粒PQE30中插入的基因片段与人釉原蛋白成熟肽基因序列完全相同.结论:从人胚胎的牙胚组织中克隆到釉原蛋白成熟肽编码序列,成功构建含有人釉原蛋白成熟肽基因的重组表达质粒.
釉原蛋白、逆转录多聚酶链式反应、重组质粒、PCR
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R781.1(口腔科学)
上海市卫生局资助项目
2004-06-18(万方平台首次上网日期,不代表论文的发表时间)
共4页
126-129