临床常用β-肾上腺素受体激动剂和拮抗剂对β-arrestin2招募作用的研究

摘要：

大量β-肾上腺素受体(β-adrenergic receptor,β-AR)药物被应用于心血管疾病等临床疾病的治疗,但许多常用的β-AR药物对下游β-arrestin偏向性信号通路的激活特性和作用并不清楚.本文旨在检测临床常用的β-AR药物对β-arrestin的招募作用.我们采用TANGO(transcriptional activation following arrestin translocation)方法在稳定转染四环素反式激活因子(tetracycline transactivator protein,tTA)依赖荧光素酶报告子和β-arrestin2-TEV融合基因的HEK293细胞系(HTLA细胞)中检测β-AR配体对β-arrestin2的招募情况.β-AR被其配体激活后,β-arrestin2被募集到受体的C端,随后G蛋白耦联受体(G protein-coupled receptors,GPCRs)融合蛋白在TEV蛋白酶裂解位点发生裂解.裂解导致tTA的释放,tTA转移到细胞核后可激活荧光素酶报告基因的转录.结果显示,非选择性β-AR激动剂肾上腺素、去甲肾上腺素和异丙肾上腺素能通过β1-AR和β2-AR招募β-arrestin2.选择性β1-AR激动剂多巴酚丁胺和得诺巴明能通过β1-AR招募β-arrestin2.选择性β2-AR激动剂沙丁胺醇和丙卡特罗能通过β2-AR招募β-arrestin2.非选择性β-AR拮抗剂阿普洛尔和吲哚洛尔能通过β1-AR招募β-arrestin2.选择性β1-AR拮抗剂塞利洛尔和贝凡洛尔能够通过β1-AR招募β-arrestin2.选择性β2-AR拮抗剂布托沙明能够通过β1-AR产生β-arrestin2招募作用.上述结果为β-AR药物的潜在作用研究提供线索,也为后续β-arrestin偏向性β-AR药物的筛选奠定研究基础.

关键词：β-肾上腺素受体、β-arrestin2、G蛋白耦联受体、荧光素酶报告基因

所属期刊栏目：74

分类号：R971;R589.2;R614

在线出版日期：2023-04-18（万方平台首次上网日期，不代表论文的发表时间）

页数：共12页

页码：993-1004