胚胎大鼠脑和脊髓神经干细胞的分离和培养

摘要：

研究采用显微解剖、无血清细胞培养和免疫荧光细胞化学染色等实验技术, 成功地建立了胚胎大鼠脑和脊髓神经干细胞(NSCs)的分离和培养方法.结果显示, (1)在含成纤维细胞生长因子-2 (FGF-2)和表皮生长因子(EGF)的无血清培养液中, 两种来源的NSCs经体外培养8-10代后, 其细胞数呈指数级增加, 其中脑来源的NSCs数由原代培养时的1×106增加至1×1012, 脊髓来源的NSCs数从1×106增加至1×1011.增殖的细胞表达神经上皮干细胞蛋白(nestin); (2)在含1%胎牛血清(FBS)的培养条件下, 它们都能被诱导分化为神经元、少突胶质细胞和星型胶质细胞.但其分化比例可随细胞传代次数的增加而改变, 其中, 大脑来源的NSCs分化为神经元的比例从第二代(P2)的11.95±2.5%下降至第五代(P5)的1.97±1.16% (P<0.01), 而少突胶质细胞的分化比例则基本保持不变, 这一分化格局同样可在脊髓来源的NSCs中发现.结果表明, 我们所分离和培养的细胞在体外经多次传代后仍具有很强的增殖能力和多向分化潜能, 它们都表达nestin, 属于中枢神经系统的干细胞.

关键词：中枢神经系统、神经干细胞、胚胎、成纤维细胞生长因子-2、表皮细胞生长因子

所属期刊栏目：55

分类号：Q78(基因工程（遗传工程）)

资助基金：上海市科技发展基金00JC14021;上海市教委资助项目99ZD08and99B20

在线出版日期：2004-01-08（万方平台首次上网日期，不代表论文的发表时间）

页数：共6页

页码：278-283