Cupriavidus metallidurans CH34中2个苯酚降解基因簇的筛选与功能鉴定

摘要：

Cupravidus metallidurans(C.metallidurans)CH34是一种重金属耐受性细菌,能在以苯酚、甲苯酚、苯甲酸、苯胺等芳香族化合物为唯一碳源和能源的培养基中生长,其基因组中含有2个苯酚降解基因簇.以载体pIndigo-BAC 5 构建C.metallidurans CH34的细菌人工染色体(bacterial artificial chromosome,BAC)文库,获得约3万个克隆,平均插入片段大小为30 kb,插入频率为98％,推测该文库覆盖CH34基因组约1240倍.用PCR筛选文库中的3 000个单克隆,共获得9个阳性克隆,其中5个克隆含有长基因簇,4个含有短基因簇,并从中得到含有全长苯酚降解基因簇的克隆.利用以苯酚为唯一碳源的无机盐培养基,研究2个基因簇在大肠杆菌中的表达情况.结果显示,两个基因簇均表现出了苯酚降解能力,短簇的降酚能力要优于长簇.

关键词：Cupriavidus metallidurans CH34、基因组、细菌人工染色体文库、苯酚、基因簇

所属期刊栏目：18

分类号：Q78(基因工程（遗传工程）)

资助基金：上海市科委重点实验室资助项目08DZ2270800;上海市高校选拔优秀青年教师科研专项基金资助项目SHU08085;上海大学创新基金

在线出版日期：2012-12-24（万方平台首次上网日期，不代表论文的发表时间）

页数：共6页

页码：435-440