人Endostatin cDNA克隆及其在大肠杆菌中的表达

摘要：

Endostatin是一种新发现的血管生成抑制因子,具有很强的抗肿瘤活性.为了研究人Endostatin的生物学功能和作用机制,作者从人胎肝组织中克隆到人Endostatin cDNA,然后将其插入到pSQE表达质粒中,转化Escherichia.coli BL21(DE3),获得了pSQE-END/BL21(DE3)表达工程菌,对其诱导表达产物hEndostatin进行了分离、纯化和复性的研究.结果表明,hEndostatin的表达量可达菌体总蛋白的30%,表达产物主要以包涵体(Inclusion bodies,IBs)形式存在于菌体中.菌体经超声破碎、离心、洗涤,然后用Ni2+-Sepharose 6B柱一步法亲和层析,得到电泳纯度为95%的hEndostatin.通过研究GSSG浓度、pH值、复性时间等参数,获得了hEndostatin包涵体的最适复性条件.经细胞毒性试验测定,复性产物对1H11内皮细胞的ED50约为700 ng/ml.

关键词：人Endostatin、基因克隆、原核表达、分离纯化、复性

所属期刊栏目：6

分类号：Q78(基因工程（遗传工程）)

在线出版日期：2004-01-08（万方平台首次上网日期，不代表论文的发表时间）

页数：共5页

页码：338-342