西葫芦ISSR-PCR反应体系优化及引物筛选

摘要：

为了确定西葫芦ISSR-PCR的最佳反应体系,以西葫芦基因组DNA为模板,采用正交试验方法,对模板DNA、引物及2×Taq PCR Master Mix的用量进行了优化,并通过梯度PCR确定不同引物的最佳退火温度.结果表明,最佳反应体系为:在20μL的体系中,模板DNA(50 ng/μL)1L,引物(10 μmol/L)3 L,Master Mix 10 μL;利用该体系从50条ISSR引物中筛选出18条扩增条带清晰、多态性好的引物.这一体系的建立及引物筛选为以后利用ISSR分子标记技术对西葫芦进行研究提供了科学依据.

关键词：西葫芦、ISSR-PCR、正交设计、引物筛选

所属期刊栏目：45

分类号：S642.6

资助基金：国家农业科技成果转化资金项目2014GB2A300017;山西省科技攻关项目201303110084;山西省回国留学人员科研资助项目2011050;山西农业大学引进人才博士科研启动基金项目2013YJ23

在线出版日期：2017-04-28（万方平台首次上网日期，不代表论文的发表时间）

页数：共4页

页码：325-327,331