10.3969/j.issn.1002-2481.2016.03.12
高产红曲色素低产桔霉素紫色红曲霉转化子筛选与代谢产物分析
以红曲米中筛选到的紫色红曲霉Mp-41菌株为出发菌株,利用农杆菌介导T-DNA插入转化技术,构建了含有983株红曲霉转化子的T-DNA插入转化子库.用紫外-可见光扫描方法等从转化子库中筛选出10株红曲色素色价稳定高于原始Mp-41菌株的转化子,薄层层析结合高效液相色谱(HPLC)技术分析了10株转化子发酵液中桔霉素的含量;其中,转化子62的红曲色素色价较高,为95.4 U/mL,是原始Mp-41菌株(色素色价50.7 U/mL)的1.88倍,桔霉素含量稳定低于原始Mp-41菌株.以原始Mp-41菌株和转化子62为试验材料,进行5L发酵罐发酵并定时取样,HPLC等方法分析生长量和发酵液中各种代谢产物的含量.结果显示,转化子62生长速度稍快于原始Mp-41菌株,红曲色素色价和莫纳可林K的含量分别为120.76 U/mL,63.72 mg/L,是原始Mp-41菌株的1.5倍和1.21倍;而桔霉素含量为1.172 4 mg/L,是原始Mp-41菌株的35.08%.因此,利用T-DNA插入的方法对红曲霉进行育种,能产生稳定的遗传变化,在红曲霉资源的利用上有一定潜力.
红曲霉、红曲色素、桔霉素、发酵、T-DNA
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Q785(基因工程(遗传工程))
国家自然科学基金项目31270061,31570013
2016-06-16(万方平台首次上网日期,不代表论文的发表时间)
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318-322