miR-199对结直肠癌细胞增殖、侵袭的影响及机制

摘要：

目的 探讨微小RNA-199(miR-199)对结直肠癌细胞增殖、侵袭的影响及其作用机制.方法 常规培养人正常结肠上皮细胞系(HCoEpiC细胞)、结直肠癌细胞系(LOVE、SW620、SW480、HT29、DLD-1细胞),用实时定量PCR法检测细胞中miR-199表达.将SW620细胞随机分为miR-199过表达组、阴性对照组及miR-199+转铁蛋白受体1(TFR1)共表达组(miR-199mimics+TFR1组),分别将miR-199mimics、mimic-NC、miR-199mimics+TFR1过表达质粒转染至细胞内;另取部分未转染细胞作为空白对照组.实时荧光定量PCR法检测TFR1 mRNA表达,MTT实验检测细胞增殖能力,Transwell侵袭实验检测细胞侵袭能力,Western blotting法检测TFR1蛋白表达,生物学软件Tar-getScan及双荧光素酶报告基因实验分析miR-199的靶基因.结果 人结直肠癌细胞系中miR-199相对表达量均低于人结肠上皮细胞系(P均<0.05),且SW620细胞中miR-199相对表达量最低,故选SW620细胞为实验细胞.miR-199过表达组miR-199相对表达量高于阴性对照组、空白对照组;转染48、72 h,miR-199过表达组A490值低于阴性对照组、空白对照组(P均<0.05);miR-199过表达组侵袭细胞数少于阴性对照组、空白对照组(P均<0.05).TFR1为miR-199潜在的预测靶基因,TFR1存在与miR-199结合的位点,TFR1 mRNA的3'UTR中存在与miR-199互补的序列.空白对照组、miR-199过表达组野生型3'UTR 的TFR1萤光素酶活性比较差异有统计学意义(P<0.05),突变型3'UTR的TFR1萤光素酶活性比较差异无统计学意义(P>0.05).miR-199过表达组TFR1 mRNA和蛋白表达均低于空白对照组、阴性对照组(P均<0.05).miR-199过表达组A490 值低于阴性对照组、空白对照组、miR-199mimics+ TFR1组(P均<0.05),侵袭细胞数少于阴性对照组、空白对照组、miR-199mimics+TFR1组(P均<0.05).结论 miR-199可抑制结直肠癌细胞增殖、侵袭,其机制可能与靶向下调TFR1表达有关.

关键词：结直肠癌、微小RNA-199、细胞增殖、细胞侵袭、转铁蛋白受体1

所属期刊栏目：63

分类号：R735.3(肿瘤学)

在线出版日期：2023-11-24（万方平台首次上网日期，不代表论文的发表时间）

页数：共5页

页码：43-47