当归多糖改善大鼠心肌缺血再灌注损伤的体内外观察及其机制探讨

摘要：

目的 建立大鼠心肌缺血再灌注损伤(MIRI)的体内、体外模型,观察当归多糖(ASP)对大鼠MIRI的改善作用并探讨其机制.方法 在体内研究,成年SD大鼠随机分为假手术组、MIRI组、ASP低剂量组、ASP高剂量组,除假手术组外,均采用冠状动脉左前降支结扎再灌注的方法建立MIRI模型,ASP低、高剂量组在建模后分别给予50、100 mg/kg的ASP灌胃,假手术组及MIRI组给予等量生理盐水灌胃,持续4周;采用ELISA法检测各组血清心肌损伤标志物肌酸激酶同工酶(CK-MB)、乳酸脱氢酶(LDH)及炎症因子肿瘤坏死因子α(TNF-α)、白细胞介素6(IL-6)、IL-1β;Western blotting法检测各组心肌组织凋亡蛋白B淋巴细胞瘤2(Bcl-2)、Bcl-2关联X蛋白(Bax)、裂解的半胱胺酸蛋白酶(cleaved Caspase-3)及toll样受体4(TLR4)/核因子κB(NF-κB)通路相关蛋白TLR4、磷酸化核蛋白(p-p65)、磷酸化NF-κB抑制蛋白α(p-IκBα)表达.在体外研究,将大鼠心肌细胞分为对照组、H/R组、H/R+ASP低剂量组、H/R+ASP高剂量组,对照组正常培养不做处理,其他3组均建立体外心肌细胞缺氧复氧(H/R)模型,建模后H/R+ASP低、高剂量组分别加入浓度为5、10 µg/mL的ASP,H/R组不做处理;采用MTT比色法检测各组心肌细胞活性,ELI-SA法检测各组心肌细胞炎症因子TNF-α、IL-6、IL-1β,Western blotting法检测各组心肌细胞凋亡蛋白Bax、Bcl-2、cleaved Caspase-3及TLR4/NF-κB通路蛋白TLR4、p-p65、p-IκBα表达.结果 在体内研究,血清心肌损伤标志物LDH、CK-MB水平及血清炎症因子TNF-α、IL-6、IL-1β水平MIRI组>ASP低剂量组>ASP高剂量组>假手术组(P均<0.05);心肌组织Bax、cleaved Caspase-3蛋白表达MIRI组>ASP低剂量组>ASP高剂量组>假手术组,心肌组织Bcl-2蛋白表达假手术组>ASP高剂量组>ASP低剂量组>MIRI组(P均<0.05);心肌组织TLR4/NF-κB通路相关蛋白TLR4、p-p65、p-IκBα表达MIRI组>ASP低剂量组>ASP高剂量组>假手术组(P均<0.05).在体外研究,心肌细胞活性对照组>H/R+ASP高剂量组>H/R+ASP低剂量组>H/R组(P均<0.05);心肌细胞炎症因子TNF-α、IL-6、IL-1β水平H/R组>H/R+ASP低剂量组>H/R+ASP高剂量组>对照组(P均<0.05);心肌细胞Bax、cleaved Caspase-3蛋白表达H/R组>H/R+ASP低剂量组>H/R+ASP高剂量组>对照组,心肌细胞Bcl-2蛋白表达对照组>H/R+ASP高剂量组>H/R+ASP低剂量组>H/R组(P均<0.05);心肌细胞TLR4/NF-κB通路相关蛋白TLR4、p-p65、p-IκBα表达H/R组>H/R+ASP低剂量组>H/R+ASP高剂量组>对照组(P均<0.05).结论 ASP在体内、体外缺血再灌注模型中均可改善大鼠MIRI,其机制可能与抑制TLR4/NF-κB通路激活、减轻炎症反应、减少细胞凋亡有关.

关键词：当归多糖、TLR4/NF-κB信号通路、炎症反应、细胞凋亡、心肌缺血再灌注损伤

所属期刊栏目：63

分类号：R542.2(心脏、血管（循环系）疾病)

资助基金：浙江省中医药科技计划科研基金项目2021ZA032

在线出版日期：2023-12-28（万方平台首次上网日期，不代表论文的发表时间）

页数：共6页

页码：45-50