10.3969/j.issn.1002-266X.2023.25.003
骨髓间充质干细胞来源外泌体中lncRNA SNHG12对心肌细胞的影响及其机制
目的 探讨骨髓间充质干细胞(BMSCs)来源外泌体中长链非编码RNA(lncRNA)小核仁RNA宿主基因12(SNHG12)对心肌细胞的影响及其机制.方法 贴壁法分离培养BMSCs并传代.取传3代BMSCs,转染SNHG12 48 h,分离外泌体并鉴定.取H9c2细胞,随机分为阴性对照(NC)外泌体组与SNHG12外泌体组,分别转染NC外泌体、SNHG12外泌体;SNHG12外泌体 + miR138-5p抑制剂组与SNHG12外泌体 + NC抑制剂组,分别转染SNHG12外泌体 + miR138-5p抑制剂及SNHG12外泌体 + NC抑制剂;SNHG12外泌体 + SH-NC组与SNHG12外泌体 + SH-SIRT1组,分别转染SNHG12外泌体 + SH-NC及SNHG12外泌体 + SH-SIRT1.制备缺氧溶液,将上述各组细胞与缺氧溶液共孵育6 h,建立体外缺氧细胞模型.收集各组细胞培养液,离心留取上清液.采用ELISA法检测上清液IL-1β、IL-18含量.收集各组细胞,采用Western blotting法检测核苷酸结合寡聚化结构域样受体3(NLRP3)、凋亡相关斑点样蛋白(ASC)、剪切的半胱氨酸蛋白酶1(Cleaved-Caspase-1)、剪切的焦孔素D(Cleaved-GSDMD)蛋白表达,采用CCK-8法检测细胞活力,采用TUNEL法检测细胞凋亡率.结果 经鉴定,成功获取BMSCs来源外泌体.在体外缺氧细胞中,SNHG12外泌体组细胞凋亡率以及NLRP3、ASC、Cleaved-Caspase-1、Cleaved-GSDMD蛋白表达和上清液IL-1β、IL-18水平均低于NC外泌体组(P均<0.05),细胞活力高于NC外泌体组(P<0.05).下调miR-138-5p表达后,BMSCs来源外泌体中SNHG12可导致NLRP3、ASC、Cleaved-Caspase-1、Cleaved-GSDMD蛋白表达降低,细胞活力升高、细胞凋亡率降低(P均<0.05);下调SIRT1表达后,BMSCs来源外泌体中SNHG12可导致NLRP3、ASC、Cleaved-Caspase-1、Cleaved-GSDMD蛋白表达升高,细胞活力降低、细胞凋亡率升高(P均<0.05).结论 BMSCs来源外泌体中lncRNA SNHG12可能通过调节miR-138-5p/SIRT1轴抑制心肌细胞炎症反应及心肌细胞焦亡和凋亡,从而发挥对心肌细胞的保护作用.
心肌梗死、外泌体、骨髓间充质干细胞、长链非编码RNA小核仁RNA宿主基因12
63
R542.2(心脏、血管(循环系)疾病)
山东省医药卫生科技发展计划项目2019WS177
2023-10-08(万方平台首次上网日期,不代表论文的发表时间)
共5页
9-13