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10.3969/j.issn.1002-266X.2023.21.006

抑制核转录因子Gli1表达对人肺腺癌耐顺铂细胞株的顺铂耐药性逆转作用观察

引用
目的 观察抑制核转录因子Gli1表达对人肺腺癌耐顺铂细胞株的顺铂耐药性逆转作用.方法 将人肺腺癌耐顺铂细胞株A549/DDP随机分为GANT61 组、环杷明组、LY294002 组、对照组,其中GANT61 组加入10 μmol/L的Gli1抑制剂GANT61,环杷明组加入10 μmol/L的Smo抑制剂环杷明,LY294002组加入20 μmol/L的PI3K抑制剂LY294002,对照组加入培养基.各组细胞继续培养48 h后,采用实时荧光定量PCR法和Western Bolt-ting法检测细胞中Gli1 mRNA和蛋白,采用MTT法测算顺铂对各组细胞的半数抑制浓度(IC50),采用Western Boltting法检测细胞中多药耐药相关蛋白(MRP1)及凋亡相关蛋白Bcl-2、Bax,采用Annexin V-FITC法测算各组细胞凋亡率.结果 GANT61组、环杷明组、LY294002组、对照组细胞中Gli1 mRNA相对表达量分别为0.30±0.08、0.62±0.12、0.68±0.11、1.05±0.10,其中环杷明组与LY294002组相比,P>0.05;其余组间两两相比,P均<0.05.GANT61组、环杷明组、LY294002组、对照组细胞中Gli1蛋白相对表达量分别为0.28±0.12、0.59±0.07、0.55±0.13、0.97±0.06,其中环杷明组与LY294002组相比,P>0.05;其余组间两两相比,P均<0.05.顺铂对GANT61组、环杷明组、LY294002 组、对照组细胞的 IC50 值分别为(7.35±1.03)、(9.86±0.71)、(10.23±1.02)、(14.26±2.10)μg/mL,其中环杷明组与LY294002组相比,P>0.05;其余组间两两相比,P均<0.05.GANT61组、环杷明组、LY294002组、对照组MRP1蛋白的相对表达量分别为0.18±0.09、0.38±0.17、0.58±0.19、0.83±0.24,组间相比,P均<0.05.GANT61组、环杷明组、LY294002组、对照组细胞凋亡率分别为27.27%±0.99%、15.45%±1.01%、12.35%±1.80%、6.25%±0.38%,其中环杷明组与LY294002组相比,P>0.05;其余组间两两相比,P均<0.05.GANT61组、环杷明组、LY294002组、对照组细胞中Bcl-2蛋白的相对表达量分别为0.15±0.08、0.33±0.15、0.63±0.13、0.91±0.19,组间相比,P均<0.05.GANT61组、环杷明组、LY294002组、对照组细胞中Bax蛋白的相对表达量分别为1.88±0.38、1.34±0.25、1.27±0.39、0.64±0.18,其中环杷明组与LY294002组相比,P>0.05;其余组间两两相比,P均<0.05.结论 抑制Gli1表达可通过降低顺铂对A549/DDP细胞的IC50、促进A549/DDP细胞凋亡,逆转A549/DDP细胞对顺铂的耐药性;Smo抑制剂环杷明、PI3K抑制剂LY294002、Gli1抑制剂GANT61均可抑制A549/DDP细胞中Gli1的表达.

核转录因子Gli1、肺腺癌、顺铂、细胞耐药、Hedgehog信号通路、PI3K/AKT信号通路、半数抑制浓度、细胞凋亡

63

R734.2(肿瘤学)

甘肃省青年科技基金计划;甘肃省自然科学基金;甘肃省高等学校创新基金项目;兰州大学第二医院萃英科技创新计划

2023-08-22(万方平台首次上网日期,不代表论文的发表时间)

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