circ_0001879调控miR-599对脂多糖诱导HUVECs氧化应激损伤的影响

摘要：

目的 探讨circ_0001879调控微小RNA-599(miR-599)对脂多糖(LPS)诱导人脐静脉血管内皮细胞(HUVECs)氧化应激损伤的影响.方法 体外传代培养HUVECs.取传 3代、对数生长期、生长状态良好的HUVECs,随机分为Control组与LPS组以及Control组、LPS组、LPS+si-NC组、LPS+si-circ_0001879组,LPS+si-NC组、LPS+si-circ_0001879组经1 μg/mL LPS处理24 h后分别予si-NC、si-circ_0001879转染,LPS组仅予LPS处理,Control组不予转染且未经LPS处理.收集细胞,采用RT-qPCR法检测circ_0001879、miR-599表达,采用Annexin V-FITC/PI双染法检测细胞凋亡率,采用Western blotting法检测凋亡相关蛋白Bcl-2、Bax表达,按相关试剂盒说明检测乳酸脱氢酶(LDH)、丙二醛(MDA)、超氧化物歧化酶(SOD)、谷胱甘肽过氧化物酶(GSH-Px)等氧化应激损伤指标含量.通过CircInteractome网站预测circ_0001879与miR-599的靶向调控关系.WT-circ_0001879和MUT-circ_0001879分别与miR-NC和miR-599共转染HUVECs,按双荧光素酶报告基因检测试剂盒说明检测荧光素酶活性.结果 LPS组circ_0001879相对表达量显著高于Control组,miR-599相对表达量显著低于Control组(t分别为15.960、14.152,P均＜0.01).与Control组比较,LPS组和LPS+si-NC组circ_0001879相对表达量、细胞凋亡率、Bax蛋白相对表达量以及LDH、MDA含量均显著升高,而Bcl-2蛋白相对表达量以及SOD、GSH-Px含量均显著降低(P均＜0.05);与LPS组和LPS+si-NC组比较,LPS+si-circ_0001879组circ_0001879相对表达量、细胞凋亡率、Bax蛋白相对表达量以及LDH、MDA含量均显著降低,而Bcl-2蛋白相对表达量以及SOD、GSH-Px含量均显著升高(P均＜0.05).经CircInterac-tome网站预测,circ_0001879与miR-599存在互补的核苷酸序列;与转染miR-NC+WT-circ_0001879的HUVECs细胞比较,转染miR-599+WT-circ_0001879的HUVECs细胞荧光素酶活性显著降低(t=17.483,P＜0.05),而转染miR-NC+MUT-circ_0001879、miR-599+MUT-circ_0001879的HUVECs细胞荧光素酶活性比较差异无统计学意义(t=0.246,P＞0.05).结论 circ_0001879可能通过靶向调控miR-599缓解LPS诱导的HUVECs氧化应激损伤.

关键词：动脉粥样硬化、人脐静脉血管内皮细胞、circ_0001879、微小RNA-599、氧化应激损伤

所属期刊栏目：63

分类号：R543.5(心脏、血管（循环系）疾病)

在线出版日期：2023-07-07（万方平台首次上网日期，不代表论文的发表时间）

页数：共5页

页码：42-46