10.3969/j.issn.1002-266X.2023.13.003
lncRNA GAS6-AS1靶向调控IL-11对子宫内膜基质细胞向成纤维细胞分化的影响
目的 探讨长链非编码RNA(lncRNA)生长停滞特异基因转录的反义RNA(GAS6-AS1)靶向调控白细胞介素11(IL-11)对子宫内膜基质细胞(ESCs)向成纤维细胞分化的影响.方法 体外传代培养ESCs,取传3~6代、对数生长期、生长状态良好的ESCs,随机分为TGF-β1未干预组和TGF-β1干预组.TGF-β1未干预组不予TGF-β1干预,TGF-β1干预组用无血清培养基饥饿培养后予TGF-β1干预,收集细胞,采用RT-qPCR法检测lncRNA GAS6-AS1、IL-11及纤维化标志物α平滑肌肌动蛋白(α-SMA)、Ⅰ型胶原蛋白α1(COL1A1)mRNA表达.另取传3~6代、对数生长期、生长状态良好的ESCs,分别转染三条si-GAS6-AS1序列以及si-Control序列,采用RT-qPCR法验证转染效率.将转染si-GAS6-AS1的ESCs用无血清培养基饥饿培养后予TGF-β1干预,收集细胞,采用Western blotting法检测IL-11、α-SMA、COL1A1蛋白表达,采用CCK-8法检测细胞增殖活性,采用Annexin V-FITC/PI双染法检测细胞凋亡率.结果 与TGF-β1未干预组比较,TGF-β1干预组lncRNA GAS6-AS1、IL-11、α-SMA、COL1A1 mRNA相对表达量均显著升高(P均<0.01).转染si-GAS6-AS1-1、si-GAS6-AS1-2、si-GAS6-AS1-3及si-Control序列的ESCs GAS6-AS1 mRNA相对表达量分别为0.22±0.04、0.27±0.06、0.81±0.07、1.00±0.00.与转染si-Control序列的ESCs比较,转染si-GAS6-AS1-1、si-GAS6-AS1-2序列的ESCs GAS6-AS1 mRNA相对表达量显著降低(P均<0.01),而转染si-GAS6-AS1-3序列的ESCs GAS6-AS1 mRNA相对表达量降低不明显(P>0.05).因此,选择si-GAS6-AS1-1、si-GAS6-AS1-2序列进行后续实验.与si-Control+TGF-β1组比较,si-GAS6-AS1-1+TGF-β1组和si-GAS6-AS1-2+TGF-β1组IL-11、α-SMA、COL1A1蛋白相对表达量及细胞增殖活性均显著降低,细胞凋亡率均显著升高(P均<0.01).结论 lncRNA GAS6-AS1通过靶向调控IL-11表达抑制ESCs向成纤维细胞分化.
宫腔粘连、长链非编码RNA生长停滞特异基因转录的反义RNA、白细胞介素11、子宫内膜基质细胞、成纤维细胞
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R711.74(妇产科学)
北京市研究型病房示范建设项目;首都医科大学附属北京妇产医院北京妇幼保健院优青人才计划专项经费资助项目
2023-05-15(万方平台首次上网日期,不代表论文的发表时间)
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