TNF-α对肠屏障功能的影响及机制

摘要：

目的 探讨肿瘤坏死因子-α(TNF-α)对肠屏障功能的影响及机制.方法 体外培养Caco-2细胞,细胞稳定生长后随机分为四组,对照组给予完全培养基培养,低剂量组给予TNF-α100μg/L,中剂量组给予TNF-α120μg/L,高剂量组给予TNF-α140μg/L,培养6 h后,收集细胞、上清及蛋白等.用倒置显微镜观察各组Caco-2细胞形态变化;用CCK-8法检测各组Caco-2细胞的增殖抑制情况;用RT-qPCR法检测各组细胞MUC2 mRNA表达;用Western blotting法检测各组细胞通路蛋白JNK1和MKK4表达.结果 不同剂量TNF-α刺激6 h后,细胞形态发生变化且细胞间紧密连接逐渐消失,细胞活力明显下降,各组差异有统计学意义(P均<0.05).对照组、低剂量组、中剂量组和高剂量组细胞活力(A450)分别为1.071±0.021、0.767±0.028、0.487±0.021、0.249±0.005;与对照组相比,低剂量组、中剂量组和高剂量组Caco-2细胞活力下降(P均<0.05);低剂量、中剂量和高剂量组两两比较差异均有统计学意义(P均<0.05).对照组、低剂量组、中剂量组和高剂量组MUC2 mRNA相对表达量分别为1、0.451±0.071、0.159±0.040、0.109±0.001;与对照组相比,低剂量组、中剂量组和高剂量组MUC2 mRNA表达逐渐降低,高剂量组较明显,差异均有统计学意义(P均<0.05).与对照组相比,低剂量组、中剂量组和高剂量组JNK1蛋白表达逐渐升高,高剂量组较明显,差异均有统计学意义(P均<0.05);低剂量组、中剂量组和高剂量组MKK4蛋白表达高于对照组(P均<0.05).结论 TNF-α可能通过JNK信号通路抑制Caco-2细胞增殖并下调MUC2表达,进而引起肠屏障功能障碍.

关键词：肠屏障功能障碍、肿瘤坏死因子-α、JNK信号通路、黏蛋白2

所属期刊栏目：62

分类号：R574.4(消化系及腹部疾病)

资助基金：国家自然科学基金81560310

在线出版日期：2022-12-30（万方平台首次上网日期，不代表论文的发表时间）

页数：共4页

页码：45-48