R406对人RASFs炎性因子分泌及生物学功能调节、关节炎小鼠关节炎症缓解作用观察

摘要：

目的 探讨R406(free base)对人类风湿关节炎关节滑膜成纤维细胞(RASFs)炎性因子分泌的抑制及生物学功能(侵袭、迁移和凋亡)的调节作用,观察R406对关节炎小鼠关节炎症的缓解作用.方法 取3～7代生长的RASFs,分为实验组、阴性对照组和阳性对照组.实验组分别用1、10、50、100 ng/mL R406和10 ng/mL IL-1β干预,阴性对照组加入DMSO,阳性对照组加入DMSO和10 ng/mL IL-1β干预.干预24 h,采用qRT-PCR法检测各组炎性因子IL-6、IL-8、CCL2 mRNA.选择最适浓度(50 ng/mL)的R406作用于RASFs(实验组)不同时间(6、12、24、48 h),阴性对照组及阳性对照组处理方法同上,采用qRT-PCR检测各组IL-6、IL-8、CCL2 mRNA,ELISA法检测各组IL-6、IL-8、CCL2蛋白,Trans Well检测各组RASFs的侵袭能力;划痕法检测细胞迁移能力;流式细胞术检测细胞凋亡率.建立Ⅱ型胶原诱导型关节炎(CIA)模型鼠,将18只8周龄的DBA 1/J小鼠平均分为实验组、阴性对照组和阳性对照组.实验组诱发CIA后腹腔注射R406,200 mg/kg,每两天注射1次;阴性对照组不诱发CIA;阳性对照组诱发CIA后腹腔注射等量DMSO,每两天注射1次.R406治疗30 d后,ELISA法检测各组小鼠血清中炎性因子IL-6、IL-8、IL-1α、COMP.结果 与阳性对照组比较,实验组中不同剂量R406作用后RASFs中炎性因子IL-6、IL-8、CCL2 mRNA表达被抑制,且在50 ng/mL时抑制效果最为显著(P均<0.01).与阳性对照组比较,实验组中50 ng/mL R406作用于RASFs不同时间,细胞中炎性因子IL-6、IL-8、CCL2蛋白的表达均被抑制,且在24 h抑制效果最显著(P均<0.01);与阳性对照组比较,实验组RASFs上清液中炎性因子IL-6、IL-8、CCL2水平降低(P均<0.01).与阳性对照组比较,实验组RASFs侵袭和迁移数均降低,凋亡率增加(P均<0.05).与阳性对照组比较,实验组小鼠血清中炎性因子IL-6、IL-8、IL-1α、COMP水平降低(P均<0.01).结论 R406可以抑制RASFs中炎性因子的分泌,调节RASFs侵袭、迁移、凋亡能力,对CIA模型鼠关节炎症具有抑制作用.

关键词：脾酪氨酸蛋白激酶抑制剂、R406、类风湿关节炎、滑膜成纤维细胞、白细胞介素6、白细胞介素8、趋化因子配体2、细胞生物学功能、小鼠

所属期刊栏目：62

分类号：R34(人体生物化学、分子生物学)

资助基金：国家自然科学基金81671624

在线出版日期：2022-07-04（万方平台首次上网日期，不代表论文的发表时间）

页数：共6页

页码：49-54