10.3969/j.issn.1002-266X.2022.11.007
沉默miR-20a-5p的肝癌细胞恶性生物学行为及Zbed3、Axin蛋白表达情况观察
目的 观察沉默miR-20a-5p通过调控三结构域蛋白家族样1(TRIML1)对肝癌细胞恶性生物学行为及锌指蛋白3(Zbed3)、Axin表达的影响.方法 在线数据库TargetScan及双荧光素酶报告基因实验证实TRIML1是miR-20a-5p的靶基因.选择肝癌细胞中miR-20a-5p、TRIML1表达明显高于人正常肝细胞7701的huh-7细胞进行实验,随机分为7组,其中模型组细胞正常培养,miR-20a-5p-NC组转染miR-20a-5p阴性对照,miR-20a-5p siRNA组转染miR-20a-5p siRNA,TRIML1-NC组转染TRIML1阴性对照,TRIML1 siRNA组转染TRIML1 siRNA,TRIML1-NC+miR-20a-5p-NC组转染TRIML1阴性对照+miR-20a-5p阴性对照,TRIML1 siRNA+miR-20a-5p siRNA组转染TRIML1 siRNA+miR-20a-5p siRNA,转染48 h.采用实时荧光定量PCR法检测各组细胞TRIML1、miR-20a-5p表达,流式细胞术、Transwell小室法检测细胞凋亡率及迁移、侵袭细胞数,Western blotting法检测Zbed3、Axin蛋白表达.结果 模型组、miR-20a-5p-NC组、TRIML1-NC组、TRIML1-NC+miR-20a-5p-NC组细胞TRIML1、miR-20a-5p相对表达量、细胞凋亡率、迁移细胞数、侵袭细胞数及Zbed3、Axin蛋白相对表达量比较P均>0.05.与模型组、miR-20a-5p-NC组、TRIML1-NC组、TRIML1-NC+miR-20a-5p-NC组比较,miR-20a-5p siRNA组、TRIML1 siRNA组、TRIML1 siRNA+miR-20a-5p siRNA组细胞TRIML1、miR-20a-5p相对表达量及迁移细胞数、侵袭细胞数、Zbed3蛋白相对表达量均降低,细胞凋亡率及Axin蛋白相对表达量均升高,且TRIML1 siRNA+miR-20a-5p siRNA组变化更明显(P均<0.05).结论 沉默miR-20a-5p表达可抑制肝癌huh-7细胞侵袭、转移及Zbed3表达,并促进细胞凋亡及Axin蛋白表达,其机制可能与正向调控TRIML1表达有关.
miR-20a-5p、肝癌细胞、TRIML1、恶性生物学行为、Zbed3、Axin
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R735.7(肿瘤学)
2022-05-26(万方平台首次上网日期,不代表论文的发表时间)
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