微小RNA-21对脓毒症急性肺损伤小鼠肺组织的修复作用及其与PTEN的关系

摘要：

目的 观察脓毒症急性肺损伤(ALI)小鼠肺组织中微小RNA-21(miR-21)的表达情况,以及干预miR-21表达对肺水肿、血清炎症因子及氧化应激的影响,探讨该作用机制与PTEN的关系.方法 取96只健康雄性昆明小鼠,采用随机数字表法分为6组:假手术组(n=32)、模型组(n=32)、miR-21前体组(MP组,n=8)、miR-21抑制剂组(MI组,n=8)、miR-21前体+PTEN抑制剂组(MP+Anti-PTEN组,n=8)、miR-21抑制剂+PTEN抑制剂组(MI+Anti-PTEN组,n=8).假手术组仅进行开腹探查盲肠;模型组采用盲肠结扎穿孔术制作ALI模型;MP组、MI组分别在尾静脉注射miR-21前体腺病毒、miR-21抑制剂腺病毒4 d后再造模;MP+Anti-PTEN组、MI+Anti-PTEN组分别在转染miR-21前体、miR-21抑制剂后,造模前30 min给予尾静脉注射PTEN抑制剂.造模后24 h,取小鼠腹主动脉取血进行血气分析,计算氧合指数(OI).取小鼠左肺组织,称取肺湿重和肺干重,计算肺湿重/干重比值(W/D).取小鼠腹主动脉血,采用ELISA法检测血清炎症因子肿瘤坏死因子α(TNF-α)、白细胞介素6(IL-6)和氧化应激指标活性氧(ROS)、超氧化物歧化酶(SOD)水平.分别于造模后6、12、24、48 h采用qRT-PCR法检测假手术组、模型组肺组织miR-21的相对表达量.于造模后24 h对假手术组、模型组、MP组、MI组采用qRT-PCR法检测肺组织miR-21表达,Western blotting法检测肺组织PTEN蛋白表达.结果 造模后24 h,与假手术组比较,模型组OI下降,W/D、TNF-α、IL-6、ROS、SOD水平升高(P均<0.05);与模型组比较,MP组、MP+Anti-PTEN组、MI+Anti-PTEN组OI升高,W/D、TNF-α、IL-6、ROS、SOD水平下降(P均<0.05),MI组OI下降,W/D、TNF-α、IL-6、ROS、SOD水平升高(P均<0.05);与MP+Anti-PTEN组比较,MI+Anti-PTEN组OI、W/D、TNF-α、IL-6、ROS、SOD水平无明显变化(P均>0.05).与假手术组比较,模型组造模后6、12、24、48 h肺组织miR-21表达均升高(P均<0.05),并于造模后24 h达峰.造模后24 h,与假手术组比较,模型组和MP组miR-21表达均升高、PTEN蛋白表达均下降,MI组miR-21表达下降、PTEN蛋白表达升高(P均<0.05);与模型组比较,MP组miR-21表达升高、PTEN蛋白表达下降,MI组miR-21表达下降、PTEN蛋白表达升高(P均<0.05).结论 脓毒症小鼠肺组织中miR-21表达增加,miR-21过表达可减轻脓毒症炎症反应及氧化应激,从而减轻肺损伤,其机制可能与抑制PTEN有关.

关键词：脓毒症;急性肺损伤;微小RNA-21;PTEN蛋白;炎症因子;氧化应激;小鼠

所属期刊栏目：62

分类号：R631(外科感染)

资助基金：河北省医学科学研究重点课题20180192

在线出版日期：2022-03-07（万方平台首次上网日期，不代表论文的发表时间）

页数：共5页

页码：30-34