环状RNA0026344靶向miR-21对肝癌细胞增殖、迁移、侵袭的影响及机制

摘要：

目的 探讨环状RNA0026344(circ_0026344)靶向微小RNA-21(miR-21)对肝癌细胞增殖、迁移、侵袭的影响及机制.方法 收集25例肝癌患者术中切除的肝癌组织及其癌旁组织(距离肿瘤边缘>3 cm),用qRT-PCR检测组织中circ_0026344、miR-21表达.常规培养HCC9204细胞,将细胞随机分组并转染,分为pcDNA组(转染pcD-NA)、pcDNA-circ_0026344组(转染pcDNA-circ_0026344)、anti-miR-NC组(转染anti-miR-NC)、anti-miR-21组(转染anti-miR-21)、pcDNA-circ_0026344+miR-NC组(转染pcDNA-circ_0026344+miR-NC)、pcDNA-circ_0026344+miR-21组(转染pcDNA-circ_0026344+miR-21 mimics).转染48 h后用RT-qPCR检测各组circ_0026344、miR-21表达,确认转染效率.用MTT法检测细胞增殖能力,用平板克隆实验检测细胞克隆形成数,用Transwell实验检测细胞迁移和侵袭能力,双荧光素酶报告实验验证circ_0026344与miR-21的靶向关系,Western blotting法检测细胞内上皮间充质转化(EMT)相关蛋白(E-cadherin、N-cadherin)表达.结果 与癌旁组织比较,肝癌组织中circ_0026344相对表达量低,而miR-21相对表达量高(P均<0.05).与pcDNA组比较,pcDNA-circ_0026344组HCC9204细胞增殖能力、克隆形成数、迁移及侵袭细胞数、N-cadherin蛋白相对表达量低(P均<0.05),E-cadherin蛋白相对表达量高(P<0.05).Circular RNA Interactome数据库在线分析显示,miR-21与circ_0026344存在特异性结合位点.与miR-NC+wt-circ_0026344共转染比较,miR-21 mimics+wt-circ_0026344共转染后细胞相对荧光素酶活性低(P<0.05);而与miR-NC+mut-circ_0026344共转染比较,miR-21 mimics+mut-circ_0026344共转染后细胞相对荧光素酶活性差异无统计学意义(P>0.05).与anti-miR-NC组比较,anti-miR-21组HCC9204增殖能力、克隆形成数、迁移和侵袭细胞数、N-cad-herin蛋白相对表达量低(P均<0.05),E-cadherin蛋白相对表达量高(P<0.05).与pcDNA-circ_0026344+miR-NC组比较,pcDNA-circ_0026344+miR-21组增殖能力、克隆形成数、迁移和侵袭细胞数、N-cadherin蛋白相对表达量高(P均<0.05),E-cadherin蛋白相对表达量低(P<0.05).结论 circ_0026344可靶向miR-21抑制肝癌细胞增殖、迁移、侵袭,其作用机制可能与调控EMT有关.

关键词：肝癌、环状RNA0026344、微小RNA-21、细胞增殖、细胞迁移、细胞侵袭

所属期刊栏目：61

分类号：R735.7(肿瘤学)

在线出版日期：2021-07-19（万方平台首次上网日期，不代表论文的发表时间）

页数：共5页

页码：39-43