过表达sFRP2基因对脂多糖诱导人脐静脉内皮细胞凋亡的影响及其分子机制

摘要：

目的 观察过表达分泌型卷曲相关蛋白2(sFRP2)对脂多糖(LPS)诱导人脐静脉内皮细胞(HUVECs)凋亡的影响,并探讨其可能的作用机制.方法 将HUVECs分为两部分,一部分加入不同浓度LPS(0、5、10、15、20μg/mL),另一部分作为对照细胞不予特殊处理,作用12 h;采用CCK-8法检测其细胞存活指数,结果显示加入10、15、20μg/mL LPS作用12 h的HUVECs细胞存活指数明显低于对照细胞(P均<0.01),选择10μg/mL LPS作用12 h作为后续实验条件.将HUVECs分为过表达组和阴性对照组,分别转染sFRP2过表达质粒及阴性对照慢病毒质粒,转染48 h后加入10μg/mL LPS作用12 h;采用实时荧光定量PCR法和Western boltting法检测sFRP2 mRNA和蛋白表达,流式细胞术检测细胞凋亡率,Western boltting法检测凋亡相关蛋白Bax、Cleaved Caspase-3、Bcl-2和Wnt/β-catenin信号通路相关蛋白Wnt1、β-catenin、Cyclin D1表达.结果 过表达组与阴性对照组sFRP2 mRNA相对表达量分别为2.69±0.13、1.04±0.21,蛋白相对表达量分别为3.89±0.18、1.05±0.24,细胞凋亡率分别为13.32％ ±1.98％、20.90％±1.72％,两组比较P均<0.01.过表达组Cleaved Caspase-3、Bax及Wnt1、β-catenin、Cyclin D1表达均低于阴性对照组,Bcl-2表达高于阴性对照组(P均<0.05).结论 过表达sFRP2可减少LPS诱导的HUVECs细胞凋亡,其机制可能与抑制Wnt/β-catenin信号通路有关.

关键词：内皮细胞、sFRP2、脂多糖、细胞凋亡、Wnt/β-catenin信号通路

所属期刊栏目：61

分类号：R285.5(中药学)

资助基金：云南省基础研究计划项目2017FB226

在线出版日期：2021-05-07（万方平台首次上网日期，不代表论文的发表时间）

页数：共4页

页码：20-23