10.3969/j.issn.1002-266X.2020.35.007
lncRNA H19对乳腺癌细胞增殖、侵袭、迁移能力的影响及其分子机制
目的 观察长链非编码RNA H19(lncRNA H19)对乳腺癌细胞增殖、侵袭、迁移能力的影响,并探讨其可能的机制.方法 采用实时荧光定量PCR法检测乳腺癌细胞系(SKBR3、MDA-MB-453、MCF-7)和正常乳腺上皮细胞系(MCF-10A)中lncRNA H19表达.将SKBR3细胞分为三组,pcDNA-H19组和si-H19组分别转染pcDNA-H19、H19 siRNA,空白对照组不进行转染,转染48 h后收集细胞.采用CCK-8法检测三组培养0、24、48、72、96 h的增殖能力(光密度值),Transwell小室侵袭实验检测细胞侵袭能力(穿膜细胞数),细胞划痕实验检测细胞迁移能力(划痕愈合率).双荧光素酶实验检测miR-194-5p与lncRNA H19的靶向结合作用,实时荧光定量PCR法检测三组miR-194-5p表达.结果 乳腺癌细胞系SKBR3、MDA-MB-453、MCF-7中lncRNA H19相对表达量分别为8.37±1.21、5.62±0.85、3.43±0.96,均高于正常乳腺上皮细胞系MCF-10A中的1.08±0.24(P均<0.01).培养24、48、72、96 h,si-H19组、空白对照组、pcDNA-H19组相同时间点光密度值均依次升高(P均<0.01);三组穿膜细胞数及划痕愈合率均依次升高,miR-194-5p相对表达量均依次降低(P均<0.01).共转染miR-194-5p mimic+H19-wt或NC mimic+H19-wt的SKBR3细胞荧光素酶活性分别为0.33±0.02、0.97±0.06(P<0.01),共转染miR-194-5p mimic+H19-mut或NC mimic+H19-mut的SKBR3细胞荧光素酶活性分别为1.02±0.04、1.06±0.05(P>0.05).结论 乳腺癌细胞lncRNA H19表达升,lncRNA H19可能通过负靶向调控miR-194-5p而促进乳腺癌细胞的增殖?侵袭和迁移.
乳腺癌、长链非编码RNAH19、细胞增殖、细胞侵袭、miR-194-5p
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R737.9(肿瘤学)
广西医科大学青年科学基金资助项目GXMUYSF201920
2021-01-08(万方平台首次上网日期,不代表论文的发表时间)
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