10.3969/j.issn.1002-266X.2020.35.006
miR-122靶向调控CREB1对膀胱癌细胞增殖、侵袭能力的影响及其分子机制
目的 观察微小RNA122(miR-122)通过靶向调控环磷腺苷效应元件结合蛋白1(CREB1)对膀胱癌细胞增殖和侵袭能力的影响,并探讨其可能的作用通路.方法 TargetScan7.1软件预测程序显示,miR-122与CREB1启动子区存在连续的结合位点,双荧光素酶基因报告实验结果显示,在膀胱癌J82细胞中miR-122可靶向负调控CREB1.将J82细胞分为三组,共转染组采用LipofectamineTM 2000转染miR-122 mimic及CREB1过表达质粒,miR-122 mimic组转染miR-122 mimic,对照组转染对照质粒,转染48 h.采用MTS法和平板克隆实验检测细胞增殖能力(分别以增殖OD值和克隆形成数表示),Transwell小室实验检测细胞侵袭能力(以穿膜细胞数表示),Western blotting法检测细胞CREB1及蛋白激酶B(Akt)、磷酸化Akt(p-Akt)、雷帕霉素靶蛋白(mTOR)、磷酸化mTOR(p-mTOR)蛋白表达.结果 与对照组比较,miR-122 mimic组和共转染组细胞增殖OD值、克隆形成数、穿膜细胞数均降低,且miR-122 mimic组降低更明显(P均<0.05).与对照组比较,miR-122 mimic组和共转染组细胞CREB1、p-Akt、p-mTOR蛋白表达降低,且miR-122 mimic组降低更明显(P均<0.05).与对照组比较,miR-122 mimic组和共转染组细胞Akt、mTOR表达均无明显变化(P均>0.05).结论 miR-122通过作用靶点CREB1负向调控Akt/mTOR通路,从而抑制膀胱癌细胞的增殖和侵袭.
膀胱癌、miR-122、环磷腺苷效应元件结合蛋白1、细胞增殖、细胞侵袭
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R737.14(肿瘤学)
吉林省教育厅"十三五"科学技术项目JJKH20190085KJ
2021-01-08(万方平台首次上网日期,不代表论文的发表时间)
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