Wnt3a对子宫内膜癌细胞转移的影响及其分子机制

摘要：

目的 观察Wnt3a对子宫内膜癌细胞转移的影响,并探讨其是否通过Dishevelled-2(Dvl-2)激活PI3K-Akt-GSK3β通路起作用.方法 取子宫内膜癌细胞Ishikaw,MTT法确定Wnt3a作用于细胞的安全浓度<500 ng/mL;以0、50、100、200、400 ng/mL Wnt3a处理后,用细胞划痕实验测算细胞迁移距离;400 ng/mL Wnt3a处理细胞0、12、24、48 h后,Western blotting法检测细胞中Dvl-2、PI3K、Akt和GSK3β的磷酸化水平;转染Dvl-2 siRNA质粒敲低Dvl-2表达后,观察Wnt3a对细胞迁移的影响;分别用LY294002(PI3K抑制剂)、CCT128930(Akt抑制剂)预处理细胞后,用Western blotting法检测Wnt3a诱导的Akt、GSK3β磷酸化水平变化;敲低Dvl-2表达后,用Western blotting法检测Wnt3a诱导的PI3K磷酸化水平变化;分别用LY294002、CCT128930、AR-A014418(GSK3β抑制剂)预处理细胞,或敲低Dvl-2表达、IGF-1(PI3K-Akt激活剂)预处理细胞后,用细胞划痕实验测算Wnt3a对细胞迁移的影响.结果 与未经处理(0 ng/mL)的细胞相比,细胞迁移距离随Wnt3a浓度增加而增加(P均<0.01);用400 ng/mL Wnt3a处理细胞后,Dvl-2、PI3K、Akt、GSK3β蛋白磷酸化水平随作用时间延长而不断升高(P均<0.01);敲低Dvl-2表达后,Wnt3a诱导的PI3K磷酸化水平降低,细胞迁移距离变小(P均<0.01);用LY294002预处理细胞后,Wnt3a诱导的Akt磷酸化水平下降,细胞迁移距离变小(P均<0.01);用CCT128930预处理细胞后,Wnt3a诱导的GSK3β磷酸化水平降低,细胞迁移距离变小(P均<0.01);用AR-A014418预处理细胞后,Wnt3a诱导的细胞迁移距离变小(P<0.001);且敲低Dvl-2表达后,Wnt3a和IGF-1诱导的细胞迁移距离变小(P均<0.01).结论 Wnt3a通过Dvl-2激活了PI3K-Akt-GSK3β信号通路,从而促进子宫内膜癌细胞的转移.

关键词：Wnt3a、Dishevelled-2、PI3K-Akt-GSK3β通路、子宫内膜癌、细胞迁移

所属期刊栏目：60

分类号：R737.33(肿瘤学)

资助基金：陕西省重点研发计划项目2019SF-210

在线出版日期：2020-11-10（万方平台首次上网日期，不代表论文的发表时间）

页数：共5页

页码：23-27