转染三磷酸腺苷酶家族蛋白2shRNA的人骨肉瘤细胞株U2-OS增殖、凋亡能力观察

摘要：

目的 观察转染三磷酸腺苷酶家族蛋白2(ATAD2)shRNA的骨肉瘤细胞株U2-OS增殖、凋亡的变化.方法 以qRT-PCR法和Western blotting法分别检测人骨肉瘤细胞(U2-OS、MG-63、SaOS-2)和人正常成骨细胞(h FOB1.19)中ATAD2mRNA、蛋白.在U2-OS细胞中转染ATAD2shRNA慢病毒载体,采用qRT-PCR法和Western blotting法检测转染效果,CCK8方法检测细胞增殖变化,平板克隆形成实验检测细胞克隆形成数目,碘化丙啶(PI)单染法检测细胞周期,膜联蛋白Ⅴ-FITC(Annexin Ⅴ-FITC)/PI双染法检测细胞凋亡率,Western blotting法检测细胞剪切的含半胱氨酸的天冬氨酸蛋白水解酶3(C-Caspase-3)、细胞周期依赖性蛋白激酶4(CDK2)、剪切的含半胱氨酸的天冬氨酸蛋白水解酶9(C-Caspase-9)、细胞周期蛋白D1(CyclinD1)蛋白.结果 骨肉瘤细胞中ATAD2mRNA、蛋白表达水平高于正常成骨细胞(P均＜0.05).ATAD2 shRNA慢病毒载体转染后的骨肉瘤细胞中ATAD2表达水平下降(P＜0.05).转染ATAD2shRNA后的骨肉瘤细胞增殖能力和克隆形成能力均降低,细胞G1期比例升高,细胞凋亡率升高,细胞中C-Caspase-3、C-Caspase-9蛋白表达升高,CDK2、CyclinD1蛋白表达降低(P均＜0.05).结论 转染ATAD2 shRNA可抑制U2-OS细胞增殖,并诱导细胞凋亡.

关键词：三磷酸腺苷酶家族蛋白2 shRNA慢病毒载体、骨肉瘤、U2-OS细胞、细胞增殖能力、细胞凋亡能力

所属期刊栏目：60

分类号：R681(骨科学（运动系疾病、矫形外科学）)

在线出版日期：2020-05-29（万方平台首次上网日期，不代表论文的发表时间）

页数：共4页

页码：10-13