外源性锌离子培养/低氧环境下大鼠Müller细胞活力、锌离子浓度变化及促红细胞生成素的调节作用观察

摘要：

目的 观察加入外源性锌离子培养/低氧环境下大鼠Müller细胞系rMC-1细胞活力、锌离子浓度变化及促红细胞生成素(EPO)的调节作用.方法 将rMC-1细胞分为ZnCl2组、ZnCl2+EPO组、正常对照组,分别加入ZnCl2、ZnCl2+EPO、等量培养基,继续培养24 h后,采用MTT法检测各组细胞光密度值,计算细胞活力,采用TUNEL法检测各组细胞凋亡率.将rMC-1细胞分为CoCl2组、CoCl2+EPO组、正常对照组,分别加入CoCl2(诱导低氧环境)、CoCl2+EPO、等量培养基,采用锌离子探针FluoZin-3 AM检测各组细胞荧光强度(以荧光强度表示细胞内锌离子浓度),采用qRT-PCR法检测各组rMC-1细胞内ZnT8 mRNA,采用Western blotting法检测各组rMC-1细胞内ZnT8蛋白.结果 ZnCl2组、ZnCl2+EPO组、正常对照组rMC-1细胞活力分别为0.252±0.034、0.342±0.031、0.513±0.040,组间相比,P均<0.05;ZnCl2组、ZnCl2+EPO组、正常对照组rMC-1细胞凋亡率分别为60.326％ ±5.230％、28.268％ ±3.756％、15.124％ ±3.521％,组间相比,P均<0.01.CoCl2组、CoCl2+EPO组、正常对照组rMC-1细胞内锌离子浓度分别为6.712％ ±1.251％、4.723％ ±0.892％、3.428％ ±0.522％,组间相比,P均<0.05;CoCl2组rMC-1细胞中ZnT8 mRNA和蛋白的相对表达量分别为0.224±0.038、2.436±0.187,CoCl2+EPO组分别为0.314±0.030、3.082±0.247,正常对照组分别为0.385±0.025、3.583±0.256,组间相比,P均<0.01.结论 外源性锌离子可引起rMC-1细胞活力下降、细胞凋亡率增加,EPO可拮抗此作用.低氧状态下rMC-1细胞内锌离子浓度增加,加入EPO后降低,其机制可能与ZnT8表达升高有关.

关键词：Müller细胞系、细胞实验、锌离子、促红细胞生成素、细胞活力、细胞凋亡、锌离子转运体8

所属期刊栏目：59

分类号：R34(人体生物化学、分子生物学)

在线出版日期：2020-03-10（万方平台首次上网日期，不代表论文的发表时间）

页数：共4页

页码：50-53