以慢病毒为载体的人骨肉瘤细胞肾上腺髓质素RNA干扰体系的构建

摘要：

目的 以人骨肉瘤细胞的肾上腺髓质素(ADM)为作用靶点,建立以慢病毒为载体的RNA干扰体系,以高效抑制ADM基因的表达.方法 构建慢病毒载体,设计3条针对ADM基因序列的shRNA序列(shRNA-1、2、3),靶向ADM shRNA与慢病毒载体连接后,挑选LV-ADM-shRNA阳性克隆进行PCR鉴定并测序.经测序确认寡核苷酸插入部位正确后,提取目的质粒LV-ADM-shRNA 1、2、3,在293T细胞中包装携带目的质粒的慢病毒,然后采用多孔稀释法测定慢病毒滴度.结果 构建3条靶向ADM的LV-shRNA慢病毒载体,并获得较高滴度的慢病毒颗粒.结论 成功建立以慢病毒为载体的人骨肉瘤细胞ADM RNA干扰体系.

关键词：RNA干扰体系、肾上腺髓质素、慢病毒载体、骨肉瘤细胞

所属期刊栏目：59

分类号：R738.1(肿瘤学)

资助基金：国家自然科学基金资助项目81702669,31300899;陕西省重点研发计划资助项目2017SF-231;陕西省自然科学基金资助项目2018JM7035;中央高校基本科研业务费项目XJJ2018046;2019年陕西省大学生创新创业训练计划项目;2018年西安交通大学医学部本科开放实验项目

在线出版日期：2019-12-31（万方平台首次上网日期，不代表论文的发表时间）

页数：共4页

页码：1-4