乙酰辅酶A合成酶2低表达人胃癌细胞株MGC80-3的顺铂敏感性观察

摘要：

目的 观察乙酰辅酶A合成酶2(ACSS2)低表达人胃癌细胞株MGC80-3的顺铂敏感性,并进一步探讨其可能作用机制.方法 采用Western blotting法检测人胃癌细胞株MGC80-3、AGS、SGC-7901、NCI-N87以及正常胃黏膜上皮细胞系RGM-1中ACSS2蛋白.对数生长期MGC80-3细胞分为A、B、C、D组,B及D组分别加入10μL脂质体Lipofectamine 2000+5μL siRNA-ACSS2转染,C组加入及A组分别加入50μL无血清纯RPMI1640培养基+5μL阴性对照(NC);A组、B组均培养72 h,C组培养48 h时加入5μg/mL的顺铂(DDP),D组转染48 h时加入5μg/mL的DDP.培养24 h时,CCK8法检测各组细胞增殖活力,培养48、72 h时流式细胞分析术测算各组细胞早晚期凋亡率,Western blotting法检测各组细胞ACSS2、p65、p-p65、B淋巴细胞瘤-2蛋白(Bcl-2)、B细胞淋巴瘤-特大型蛋白(Bcl-xL)、凋亡蛋白Bcl-2相关的X蛋白(Bax).结果 MGC80-3、AGS、SGC-7901、NCI-N87及RGM-1细胞ACSS2蛋白相对表达量分别为0.80±0.03、0.62±0.04、0.60±0.04、0.72±0.05、0.41±0.04.与RGM-1细胞比较,MGC80-3、AGS、SGC-7901、NCI-N87细胞ACSS2相对表达量升高(P均<0.01).A、B、C、D组细胞增殖活力分别为98.67％ ±4.89％、92.67％ ±7.86％、62.67％ ±4.05％、34.67％ ±7.61％,A组与B组相比无明显差异(P>0.05);与A组比较,C组细胞增殖活力下降(P<0.001);与B、C组比较,D组细胞增殖活力均下降(P均<0.001).A、B、C、D组早期细胞凋亡率分别为1.06％ ±0.02％、1.13％ ±0.08％、7.62％ ±0.55％、14.33％ ±0.21％,晚期细胞凋亡率分别为8.01％ ±0.05％、8.13％ ±0.06％、10.81％ ±0.43％、15.98±0.18％.与A组比较,C、D组细胞早、晚期凋亡率均升高(P均<0.05);与B组比较,D组早、晚期凋亡率均升高(P均<0.05);与C组比较,D组细胞早、晚期凋亡率均升高(P均<0.05).与A组比较,C组p-p65、Bax蛋白相对表达量升高,Bcl-2、Bcl-xL相对表达量降低(P均<0.05);与B组比较,D组细胞p65、p-p65、Bcl-2、Bcl-xL相对表达量均降低、Bax相对表达量升高(P均<0.05).结论 ACSS2低表达的MGC80-3细胞DDP敏感性升高.ACSS2可能通过调控NF-κB信号通路及Bcl-2、Bcl-xL、Bax蛋白的表达提高MGC80-3细胞的DDP敏感性.

关键词：乙酰辅酶A合成酶2、核因子κB、B淋巴细胞瘤-2蛋白、B细胞淋巴瘤-特大型蛋白、Bcl-2相关的X蛋白、胃癌、顺铂、化疗敏感性

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分类号：R735.2(肿瘤学)

资助基金：江苏省医学创新团队项目CXTDC2016009;江苏省科技项目BE2017696

在线出版日期：2019-07-19（万方平台首次上网日期，不代表论文的发表时间）

页数：共4页

页码：32-35