基质细胞衍生因子-1基因转染对人胃癌细胞株SGC7901增殖、耐药的影响及其机制

摘要：

目的 观察基质细胞衍生因子-1(SDF-1)基因转染对人胃癌细胞株SGC7901增殖、耐药的影响,并探讨其可能作用机制.方法 取对数生长期SGC7901细胞分为实验组、阴性对照组、空白对照组,实验组、阴性对照组分别转染pcDNA3.1-SDF-1质粒、pcDNA3.1质粒(空白质粒),空白对照组不做任何处理.质粒转染48 h时分别采用RT-PCR法、Western bloting法检测细胞SDF-1 mRNA及蛋白,质粒转染24、48、72、96 h时MTT法测算三组细胞增殖能力(以光密度OD值表示),质粒转染48 h时观察三组细胞对奥沙利铂的耐药性(以奥沙利铂对细胞的半数抑制浓度IC50表示),质粒转染48 h时流式细胞仪测算三组细胞凋亡率,质粒转染48 h时Western blotting法检测三组细胞上皮型钙黏蛋白(E-cadherin)、神经型钙黏蛋白(N-cadherin)及波形蛋白(Vimentin)、微管相关蛋白1轻链3Ⅱ(LC3-Ⅱ)自噬相关因子(Beclin 1).结果 与空白对照组、阴性对照组比较,培养48 h时实验组细胞SDF-1 mR-NA及蛋白相对表达量均升高(P均<0.05).与空白对照组、阴性对照组比较,培养24、48、72、96 h实验组细胞OD值均升高(P均<0.05).质粒转染48 h时奥沙利铂对实验组、空白对照组、阴性对照组细胞的IC50值分别为28.039±3.011、10.403±1.253、10.612±1.044(μg/mL),与空白对照组、阴性对照组比较,奥沙利铂对实验组细胞的IC50值升高(P均<0.05).质粒转染48 h时实验组、空白对照组、阴性对照组细胞凋亡率分别为39.10％ ±2.26％、53.90％ ±3.19％、51.30％ ±3.37％,与空白对照组、阴性对照组比较,实验组细胞凋亡率降低(P均<0.05).质粒转染48 h时倒置显微镜下可见实验组细胞存在上皮-间质转化(EMT)现象,加入奥沙利铂后实验组细胞自噬活动增加;与空白对照组、阴性对照组比较,实验组细胞E-cadhein蛋白相对表达量降低,N-cadhein、Vim-entin、LC3-Ⅱ、Beclin 1蛋白相对表达量均升高(P均<0.05).结论 SDF-1基因过表达可促进SGC7901细胞增殖,显著提高SGC7901细胞对奥沙利铂的耐药性,可能与SDF-1促进EMT、诱导细胞自噬增加进而抑制细胞凋亡有关.

关键词：基质细胞衍生因子-1、胃癌、胃癌细胞株SGC7901、细胞增殖、细胞耐药、上皮—间质转化、细胞自噬

所属期刊栏目：59

分类号：R735.2(肿瘤学)

资助基金：河北省重点研发计划自筹项目172777201

在线出版日期：2019-07-19（万方平台首次上网日期，不代表论文的发表时间）

页数：共5页

页码：23-27