糖尿病肾病小鼠肾组织与细胞中miR-92b表达及其对纤维化的影响

摘要：

目的 观察糖尿病肾病(DN)小鼠及人肾小管上皮细胞中微小RNA 926(miR-92b)的表达变化,并探讨其对肾纤维化的影响与机制.方法 ①小鼠实验:选取8周龄雄性小鼠12只,随机分为Dia组6只和Con组6只,Dia组腹腔内一次性注射STZ溶液,5个月后即制备成功DN模型;Con组注射等量柠檬酸-柠檬酸钠缓冲液.取两组小鼠肾组织,采用RT-PCR法检测miR-92b表达,Western blotting法检测磷脂酰肌醇-3激酶-蛋白激酶(PI3K/Akt)相关蛋白Akt、p-Akt和纤维链接蛋白(FN)蛋白表达.②细胞实验:培养人肾小管上皮细胞株HK-2,分为高糖组、低糖组、高渗对照组,分别用25 mmol/L右旋葡萄糖、5 mmol/L右旋葡萄糖、25 mmol/L左旋葡萄糖刺激24 h,采用RT-PCR法检测miR-92b表达,Western blotting法检测PI3K/Akt信号通路相关蛋白Akt、p-Akt和FN蛋白表达.将HK-2细胞分为DG组、HG组、HG+miR-92b组和HG+Neg组,DG组用25 mmol/L左旋葡萄糖刺激24 h,HG组、HG+miR-92b组和HG+Neg组用25 mmol/L右旋葡萄糖刺激24 h;然后采用细胞瞬时转染技术,将miR-92b转染至HG+miR-92b组细胞中,将miRNEG对照转染至HG+Neg组细胞中,HG组、DG组不转染.转染24 h后收集细胞,采用Western blot-ting法检测Akt、p-Akt和FN蛋白表达.结果 与对照组相比,糖尿病肾病模型组小鼠肾组织和细胞中miR-92b的表达量降低,p-Akt/Akt和FN/β-actin相对蛋白表达量升高(P均<0.05).与DG组相比,p-Akt/Akt和FN/β-actin相对蛋白表达量在HG组HK-2细胞中增高(P均<0.05);与HG组相比,HG+92b组p-Akt/Akt和FN/β-actin相对蛋白表达量均降低(P均<0.001).结论 DN小鼠及细胞中miR-92b表达水平降低,PI3K/Akt信号通路被激活和FN mRNA表达水平升高,过表达miR-92b可抑制PI3K/Akt信号通路、降低FN蛋白表达,从而减轻纤维化.

关键词：糖尿病肾病、微小RNA-92b、蛋白激酶B、磷酸化Akt、纤维链接蛋白、肾纤维化

所属期刊栏目：59

分类号：R587.2;R364.3(内分泌腺疾病及代谢病)

在线出版日期：2019-07-09（万方平台首次上网日期，不代表论文的发表时间）

页数：共5页

页码：48-52