27nt-miRNA对人脐带间充质干细胞定向内皮细胞分化和管腔形成的影响及其分子机制

摘要：

目的 探讨27nt-miRNA对人脐带间充质干细胞(hUCMSCs)定向内皮细胞分化和分化后细胞管腔形成能力的影响,并探讨其分子机制.方法 构建27nt-miRNA、anti-27nt-miRNA及对照慢病毒载体.将hUCMSCs分为27nt-miRNA组、anti-27nt-miRNA组、对照组,分别转染27nt-miRNA、anti-27nt-miRNA及对照慢病毒载体后观察转染效率,诱导分化并观察细胞形态变化,MTT检测分化后细胞增殖能力,硝酸还原酶法检测分化过程中细胞的一氧化氮(NO)产量,人工基底膜检测分化后细胞的成管能力,RT-PCR、免疫细胞化学和Western blotting分别检测分化后细胞的内皮型一氧化氮合酶(eNOS)mRNA和蛋白.结果 与对照组相比,27nt-miRNA组hUCMSCs分化程度低,未见管腔样网络结构;分化第9天,27nt-miRNA组细胞NO产量较对照组降低33.49％(P<0.05)、eNOS mRNA表达量较对照组降低23.81％(P<0.01)、eNOS蛋白表达较对照组降低24.56％(P<0.05);anti-27nt-miRNA组的上述指标较对照组及27nt-miRNA组升高(P<0.05或P<0.01).结论 27nt-miRNA明显抑制hUCMSCs定向内皮细胞分化及管腔形成能力,其作用机制与27nt-miRNA抑制eNOS蛋白表达及NO合成有关.

关键词：27nt-微小RNA、非编码RNA、干细胞分化、间充质干细胞、人脐带间充质干细胞、内皮细胞、一氧化氮合酶

所属期刊栏目：58

分类号：R329.2(人体形态学)

资助基金：国家自然科学基金资助项目81373403

在线出版日期：2018-10-15（万方平台首次上网日期，不代表论文的发表时间）

页数：共5页

页码：23-27