噬菌体展示技术筛选胃癌高表达CD44分子特异性多肽序列的可行性分析

摘要：

目的 探讨噬菌体展示技术筛选胃癌高表达CD44分子特异性多肽序列的可行性.方法 使用噬菌体展示随机十二肽文库,以CD44纯化蛋白为筛选靶点,进行4轮亲和力筛选.从第四轮的洗脱物中随机挑选30个噬菌体克隆,对这些克隆进行测序并对序列进行生物信息学分析.通过ELISA法检测噬菌体克隆对CD44分子的亲和力,挑选阳性克隆,再通过细胞免疫荧光法进一步鉴定阳性克隆.结果 从第4轮的洗脱物中随机挑选的30个噬菌体克隆中共有7种多肽序列,重复20次六肽基序WHXXXX.该基序与CD44透明质酸结合域能很好地结合,ELSIA法挑选出 S1、S2、 S5、 S7 四个阳性克隆.细胞免疫荧光法鉴定出对 CD44 亲和力最好的克隆为S1-WHXXXXXXQQA.结论 通过噬菌体展示技术筛选S1-WHXXXXXXQQA多肽序列对CD44的亲和力和特异性最好;该序列有望成为特异性探针用于胃癌的分子影像学诊断.

关键词：胃癌、噬菌体、噬菌体展示技术、多肽、CD44

所属期刊栏目：58

分类号：R446.1(诊断学)

资助基金：陕西省教育厅科学研究项目17JK0660

在线出版日期：2018-08-15（万方平台首次上网日期，不代表论文的发表时间）

页数：共4页

页码：10-13