10.3969/j.issn.1002-266X.2018.12.003
BMP-2对间充质干细胞促迸造血干细胞增殖的影响及其机制
目的 探讨人骨形态发生蛋白2(BMP-2)对间充质干细胞(MSC)促迸造血干细胞(HSC)增殖的影响及其机制.方法 采用全骨髓贴壁法体外扩增成人骨髓MSC至第3代,采用流式细胞术鉴定MSC纯度为52.4%;通过miniMACS磁珠分选仪从骨髓中分选人骨髓CD34 +细胞即HSC,并用流式细胞术鉴定其纯度为81.9%;利用Transwell非接触共培养骨髓CD34 +细胞与第3代MSC,计数造血干细胞,确定HSC增殖最快的时间点为共培养的第7天.将细胞分为六组,HSC组、MSC组单细胞培养,MSC+BMP-2组、HSC+BMP-2组分别加入100 ng/mL BMP-2共培养,HSC+MSC组两种细胞共培养,HSC+MSC+BMP-2组两种细胞与100 ng/mL BMP-2共培养.在培养第7天时,采用细胞计数板计数HSC数量,采用实时荧光定量qPCR法检测增殖指数Ki67及促血管形成相关因子血管生成素受体(Tie2)、血管内皮生长因子(VEGF)、血管生成素1(Ang1)mRNA表达.结果 HSC组、HSC+BMP-2组、HSC+MSC 组、HSC +MSC +BMP-2组HSC数量分别为(15.37 ±0.42)、(37.81 ±1.07)、(117.00 ± 2.53)、(129.06 ±5.13)×104个,组间比较P<0.05或<0.01.HSC组、HSC+BMP-2组、HSC+MSC组、HSC+MSC+BMP-2组Ki67及Tie2 mRNA相对表达量逐渐升高,MSC组、MSC+BMP-2组、HSC+MSC组、HSC+MSC+BMP-2组VEGF、Ang1 mRNA相对表达量逐渐升高,组间比较P<0.05或<0.01.结论 BMP-2可协同MSC促迸HSC增殖,其机制可能与BMP-2促迸促血管形成相关因子VEGF、Ang1和Tie2表达有关.
造血干细胞、间充质干细胞、人骨形态发生蛋白2、细胞增殖
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R552(血液及淋巴系疾病)
国家自然科学基金资助项目81450030;四川省教育厅重大培育项目14CZ0017
2018-05-11(万方平台首次上网日期,不代表论文的发表时间)
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