10.3969/j.issn.1002-266X.2018.09.012
ZEB2基因沉默对胃癌细胞奥沙利铂耐药性的影响
目的 探讨转录因子E盒结合锌指蛋白2 (ZEB2)基因沉默对胃癌细胞奥沙利铂(L-OHP)耐药性的影响.方法 采用体外间歇刺激法建立胃癌L-OHP获得性耐药细胞株SGC-7901/L-OHP,MTT法检测SGC-7901及SGC-7901/L-OHP细胞对L-OHP的化疗敏感性,并计算SGC-7901/L-OHP的细胞耐药指数(RI);蛋白免疫印迹法检测SGC-7901及SGC-7901/L-OHP细胞中ZEB2蛋白表达;在SGC-7901/L-OHP细胞中,应用小于扰RNA片段(siRNA)干扰法沉默ZEB2基因表达,荧光实时定量PCR(qRT-PCR)和Western blotting法检测siRNA-ZEB2对ZEB2基因的沉默效率.沉默ZEB2基因表达后,MTT法检测SGC-7901/L-OHP细胞对L-OHP的化疗敏感性,流式细胞术(FCM)检测细胞凋亡情况.结果 对L-OHP耐药的胃癌细胞株SGC-7901/L-OHP建立成功,且细胞的RI为7.69.与SGC-7901细胞相比,耐药细胞SGC-7901/L-OHP中ZEB2蛋白表达增加(P<0.05);qRT-PCR和Western blotting 结果显示,沉默ZEB2基因后,SGC-7901/L-OHP细胞中ZEB2的mRNA和蛋白表达均降低(P均<0.05);MTT实验结果显示,si-ZEB2组SGC-7901/L-OHP细胞的IC50值为(27.06±7.43) μg/mL,低于空白对照组的(100.7±14.43)μg/mL和NC组的(91.95±16.43) μg/mL(P均<0.05).si-ZEB2组、空白对照组、NC组SGC-7901/L-OHP细胞凋亡率分别为55.32%±9.63%、20.63%±3.28%、22.83% ±4.81%,si-ZEB2组与空白对照组、NC组比较,P均<0.05.结论 沉默ZEB2基因表达能增加胃癌细胞对L-OHP的化疗敏感性.
胃癌、奥沙利铂、转录因子E盒结合锌指蛋白2、耐药
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R735.2(肿瘤学)
江苏省自然科学基金资助项目BK20140214;吴阶平医学基金会资助项目320.6750.11088
2018-07-02(万方平台首次上网日期,不代表论文的发表时间)
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