10.3969/j.issn.1002-266X.2018.04.007
丁胱亚磺酰亚胺对正常肝细胞的毒性作用及其机制探讨
目的 探讨丁胱亚磺酰亚胺(BSO)对人胚正常肝细胞株L-02的毒性及其机制.方法 ①用0、10、25、50、100和200 μmol/L的BSO孵育L-02细胞48 h,用MTT法测算细胞存活率.②用0、10、25、50、100、200 μmol/L的BSO培养L-02细胞48 h,用DTNB法检测细胞内还原型谷胱甘肽(GSH)水平.③用200 μmol/L的BSO培养L-02细胞0、2、12、24、36、48 h,用Western blotting法测算细胞p38磷酸化水平.④用200 μmol/L的BSO培养L-02细胞0、2、6、12、24、48 h,用荧光探针H2DCFDA法测算细胞活性氧簇(ROS)水平.⑤L-02细胞分为对照组、BSO组、SB203580组和BSO+SB203580组.对照组不加任何药物;BSO组加入终浓度为200 μmol/L的BSO;SB203580组加入终浓度为20 μmol/L的SB203580;BSO+SB203580组先加入终浓度为20 μmol/L的SB203580孵育15 min后加入终浓度为200 μmol/L的BSO.24 h后采用MTT法测算各组细胞存活率,采用荧光探针H2DCFDA法检测ROS水平.结果 ①从50 μmol/L开始,BSO可以剂量相关性地降低L-02细胞的存活率(P均<0.05).②BSO可剂量相关性地降低L-02细胞GSH含量,BSO浓度为25 μmol/L时达到最低值.③BSO呈时间依赖性增加L-02细胞内p38磷酸化水平(P均<0.05).④加入BSO后L-02细胞ROS水平均较对照组提高(P均<0.05),培养24 h时达到高峰.⑤BSO组L-02细胞ROS水平高于对照组(P<0.05),细胞存活率低于对照组(P<0.05);SB203580组L-02细胞ROS水平和细胞存活率与对照组相比P均>0.05;BSO+SB203580组L-02细胞ROS水平低于BSO组(P<0.05),细胞存活率高于BSO组(P<0.05).结论 BSO对人正常肝细胞具有毒性作用,其机制可能是通过促进p38磷酸化和ROS生成,降低GSH水平实现的.
丁胱亚磺酰亚胺、肝细胞、细胞存活率、谷胱甘肽合成酶、p38蛋白、活性氧簇
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R992(毒物学(毒理学))
2018-03-20(万方平台首次上网日期,不代表论文的发表时间)
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