miR-373-3p低表达慢病毒载体构建及其对子宫内膜癌细胞增殖迁移的抑制作用

摘要：

目的 构建人miR-373-3p低表达慢病毒载体,探讨miR-373-3p低表达对子宫内膜癌HEC-1A细胞增殖和迁移能力的影响.方法 利用PCR扩增包含miR-373-3p前体序列的目的基因,经酶切后克隆入慢病毒载体GV280中构建GV280-pre-miR-373-3p inhibitor表达载体,通过与包装质粒共转染293T细胞,进行慢病毒的包装和滴度测定.分别用空载慢病毒(空载病毒组)及重组慢病毒miR-373-3p(miR-373-3p组)感染HEC-1A细胞,并设立空白对照组.采用RT-PCR法检测细胞miR-373-3p mRNA的相对表达水平,CCK-8法检测培养24、48、72、96 h时细胞增殖活力,细胞划痕和Transwell小室试验检测培养24、48 h时细胞迁移能力.结果 成功构建了人miR-373-3p低表达慢病毒载体.与空白对照组和空载病毒组比较,miR-373-3p组miR-373-3p相对表达量低,培养48、72、96 h HEC-1A细胞增殖活力均降低(P均<0.05),24、48 h HEC-1A细胞划痕面积迁移率低,24 h穿膜细胞数少(P均<0.05).空载病毒组及空白对照组各指标比较,P均>0.05.结论 成功构建了人miR-373-3p低表达慢病毒载体,miR-373-3p低表达可抑制人子宫内膜癌细胞HEC-1A的增殖、迁移能力.

关键词：子宫内膜癌、HEC-1A细胞、微小RNA、miRNA-373-3p、慢病毒载体、细胞增殖、细胞迁移

所属期刊栏目：57

分类号：R737.33(肿瘤学)

资助基金：广西医疗卫生适宜技术研究与开发项目S201520

在线出版日期：2017-12-27（万方平台首次上网日期，不代表论文的发表时间）

页数：共4页

页码：20-23