10.3969/j.issn.1002-266X.2017.34.002
小干扰RNA与反义寡核苷酸技术抑制肝星状细胞RhoA表达的效果比较
目的 对比观察小干扰RNA(siRNA)和反义寡核苷酸(ASODN)技术抑制肝星状细胞RhoA表达的效果.方法 将培养的大鼠肝星状细胞株HSC-T6随机分为siRNA组和ASODN组,两组又分别分为A、B、C、D各4个亚组;siRNA组和ASODN组中的A亚组不转染质粒, C、D、B亚组分别采用siRNA、ASODN技术转染大鼠RhoA特异性Rat1 、Rat2质粒及HK-A阴性对照质粒.转染48 h取各组细胞,以RT-PCR技术检测细胞中的RhoA、Ⅰ型胶原(Col Ⅰ) mRNA,酶联免疫吸附法检测细胞上清液中的透明质酸(HA)及层粘连蛋白(LN).结果 siRNA组与ASODN组中RhoA、Col Ⅰ mRNA均以C亚组表达量最低,组内A、C亚组比较差异有统计学意义(P均<0.05),组内其余亚组间比较差异无统计学意义(P均>0.05);siRNA组C亚组RhoA、Col Ⅰ mRNA相对表达量低于ASODN组(P均<0.05),两组A、B、D同亚组间比较差异无统计学意义(P均>0.05).siRNA组与ASODN组细胞上清液HA、LN水平均以C亚组最低,组内A、C亚组比较差异有统计学意义(P均<0.05),组内其余亚组间比较差异无统计学意义(P均>0.05);siRNA组C亚组细胞上清液HA、LN水平低于ASODN组(P均<0.05),两组A、B、D同亚组间比较差异无统计学意义(P均>0.05).结论 siRNA和ASODN均可抑制大鼠HSC-T6细胞的RhoA表达,但siRNA下Rat1质粒所介导的 RNA干扰技术相对于ASODN能更有效抑制HSC-T6细胞外基质HA、Col Ⅰ、LN的生成.
小干扰RNA、反义寡核苷酸、RhoA、透明质酸、Ⅰ型胶原、层粘连蛋白、肝星状细胞
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R365;Q522(病理学)
河南省中医药科学研究专项课题2014ZY02027
2017-09-28(万方平台首次上网日期,不代表论文的发表时间)
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