3MA对Ce6-PDT诱导结肠癌SW620细胞凋亡及自噬的影响

摘要：

目的 探讨自噬抑制剂3-甲基腺嘌呤(3MA)对Ce6-PDT诱导结肠癌SW620细胞凋亡及自噬的影响.方法 取对数生长期SW620细胞,分为空白对照组、单纯光照组、Ce6-PDT组和3MA-Ce6-PDT组,Ce6-PDT组加入不同浓度Ce6(0.125、0.25、0.5、1.0、2.0、4.0、8.0μg/mL),3MA-Ce6-PDT组给予1.0μg/mL的Ce6+5 mmol/mL的3MA.采用MTT法测算细胞存活率;AnnexinV-PE/7-ADD染色及罗丹明123联合流式细胞仪检测细胞凋亡率和细胞线粒体膜电位变化;吖啶橙染色联合荧光显微镜观察细胞自噬体形成;蛋白免疫印迹法检测细胞凋亡相关蛋白Caspase-3、B细胞淋巴瘤/白血病基因-2(Bcl-2)及自噬相关蛋白LC3Ⅱ/Ⅰ表达.结果 Ce6-PDT组细胞存活率与Ce6浓度浓度呈负相关(r=-0.820,P<0.01),细胞凋亡率与Ce6浓度呈正相关(r=0.845,P<0.01).选取细胞存活率和细胞凋亡率约为50%时Ce6浓度1μg/mL为后续给药浓度.在Ce6浓度达到1μg/mL时,线粒体膜电位随Ce6浓度增加而降低(P<0.01).空白对照组和单纯光照组几乎没有亮红色荧光产生,Ce6-PDT组中有大量亮红色荧光出现,3MA-Ce6-PDT组中出现亮红色荧光的数量较Ce6-PDT组减少.与Ce6-PDT组相比,3MA-Ce6-PDT组细胞存活率降低、细胞凋亡率升高、自噬相关蛋白表达降低、凋亡相关蛋白表达增加(P均<0.05).结论 Ce6-PDT可引起结肠癌SW620细胞发生凋亡和自噬,3MA会促进Ce6-PDT诱导的结肠癌细胞SW620凋亡.

关键词：结肠肿瘤、细胞自噬、细胞凋亡、光动力治疗、二氢卟吩e6、3-甲基腺嘌呤

所属期刊栏目：57

分类号：R735.3(肿瘤学)

资助基金：新疆维吾尔自治区自然科学基金-医学联合基金项目2014211C003

在线出版日期：2017-07-26（万方平台首次上网日期，不代表论文的发表时间）

页数：共4页

页码：1-4