10.3969/j.issn.1002-266X.2017.23.010
转染tbx2 siRNA对人前列腺癌细胞增殖、迁移、侵袭及上皮-间质转化的影响
目的 观察转染T-BOX转录因子2(tbx2)小干扰RNA(siRNA)对人非雄激素依赖性前列腺癌PC3细胞和雄激素依懒性前列腺癌LNCaP细胞增殖、迁移、侵袭及上皮-间质转化(EMT)的影响.方法 将体外培养的人前列腺癌PC3细胞随机分为观察组和对照组,通过SiLentFectTM Lipid Reagent技术分别转染tbx2 siRNA和阴性对照siRNA,继续培养48 h.采用Western blotting法检测两组细胞中tbx2蛋白相对表达量.采用细胞计数试剂盒(CCK-8)法检测两组细胞增殖活性(以OD450表示).采用Transwell迁移实验检测两组细胞迁移细胞数.采用Transwell侵袭实验检测两组细胞侵袭细胞数.采用Western blotting法检测两组细胞EMT相关标志物E-钙黏蛋白(E-cadherin)、N-钙黏蛋白(N-cadherin)、波形蛋白(Vimentin)、纤维黏连蛋白(Fibronectin)及EMT相关上游转录因子Snail、Twist的表达.另取LNCaP细胞进行相同实验.结果 转染48 h后观察组、对照组PC3细胞中tbx2相对表达量分别为0.345±0.016、0.723±0.031,LNCaP细胞中tbx2相对表达量分别为0.315±0.006、0.692±0.010.观察组PC3、LNCaP细胞中tbx2相对表达量均低于对照组(P均<0.05).将转染后的两种前列腺癌细胞继续培养24、48、72 h后,PC3细胞对照组OD450值分别为0.487±0.026、0.868±0.031、1.387±0.107,观察组分别为0.315±0.022、0.550±0.027、0.765±0.046.LNCaP细胞对照组OD450值分别为0.388±0.032、0.722±0.032、1.187±0.135,观察组分别为0.251±0.021、0.450±0.037、0.625±0.066.相同时间点观察组PC3、LNCaP细胞OD450低于对照组(P均<0.05).观察组与对照组PC3细胞迁移细胞数分别为(118.67±6.11)、(292.33±5.03)个;LNCaP细胞迁移细胞数分别为(85.67±4.31)、(192.33±8.07)个.观察组PC3、LNCaP细胞迁移数目均低于对照组(P均<0.05).观察组,对照组PC3细胞侵袭细胞数分别为(89.00±3.02)、(186.33±5.84)个;LNCaP细胞侵袭细胞数分别为(81.67±3.42)、(232.33±7.42)个.观察组PC3、LNCaP细胞迁移数目均低于对照组(P均<0.05).观察组PC3、LNCaP细胞E-adherin表达高于对照组(P均<0.05);N-cadherin、Vimentin、Fibronectin及Snail、Twist相对表达量低于对照组(P均<0.05).结论 转染tbx2 siRNA可以抑制细胞增殖,降低细胞迁移及侵袭能力,抑制细胞EMT过程.
前列腺癌、T-BOX转录因子2、微小RNA、转染、细胞增殖、细胞迁移、细胞侵袭、上皮-间质转化
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R737.25(肿瘤学)
2017-07-14(万方平台首次上网日期,不代表论文的发表时间)
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