甲状旁腺激素相关蛋白、单羧酸转运泵家族1信号通路对肺腺癌细胞衰老的调节作用及其机制

摘要：

目的 探讨调节甲状旁腺激素相关蛋白(PTHrP)、单羧酸转运泵家族1(MCT1)信号通路对Lewis 肺腺癌细胞株LLC细胞衰老的影响及其机制.方法 将LLC细胞分为A、B、C、D组,每组10孔.分别加入PTHrP信号通路激活剂PTHrP(1~34)、PTHrP受体竞争抑制物PTHrP(7~34)、MCT1信号通路抑制剂 AZD3965、PBS培养72 h后收集细胞.用β-半乳糖苷酶(βGal)染色法观察各组细胞衰老程度,结果以细胞中βGal阳性染色面积占细胞总面积的百分比表示.用实时荧光定量PCR方法检测各组细胞中PTHrP mRNA 、MCT1 mRNA 表达.建立细胞pHi与细胞内BCECF荧光强度关系的标准曲线,细胞pHi结果以495 nm/440 nm延荧光强度比值表示.按照试剂盒说明书操作检测各组细胞外乳酸水平.结果 A、B、C、D组细胞中βGal阳性染色面积占总细胞面积百分比分别为8.47%±0.15%、12.56%±0.20%、16.66%±0.20%、9.52%±0.30%.B、C组细胞中βGal阳性染色面积占总细胞面积百分比与D组相比,P均<0.05.A、B、C、D组细胞中PTHrP mRNA表达量分别为11.49±0.42、7.68±0.10、8.56±0.13、9.35±0.13,MCT1 mRNA 表达量分别为7.84±0.19、4.38±0.09、3.53±0.10、6.58±0.21.A组细胞中PTHrP mRNA 表达量高于B、C、D组(P均<0.05);B组细胞中PTHrP mRNA 表达量低于C、D组(P均<0.05);C组细胞中PTHrP mRNA 表达量低于D组(P<0.05);A组细胞中MCT1 mRNA 表达量高于B、C、D组(P均<0.05);B组细胞中MCT1 mRNA 表达量高于C组(P<0.05),但低于D组(P<0.05);C组细胞中MCT1 mRNA 表达量低于D组(P<0.05).A、B、C、D组细胞pHi分别为3.39±0.12、6.05±0.12、7.08±0.09、4.66±0.08,细胞外乳酸水平分别为(8.34±0.12)、(5.13±0.15)、(3.39±0.10)、(7.33±0.11)U.A组细胞pHi低于B、C、D组(P均<0.05);B组细胞pHi低于C组(P<0.05),但是高于D组(P<0.05);C组细胞pHi高于D组(P<0.05);A组细胞外乳酸水平高于B、C、D组(P均<0.05);B组细胞外乳酸水平高于C组(P<0.05),但是低于D组(P<0.05);C组细胞外乳酸化水平低于D组(P<0.05).Pearson相关性分析结果显示,各组细胞衰老程度与PTHrP mRNA表达量、MCT1 mRNA表达量、pHi、细胞外乳酸水平均相关,r分别为-0.613、-0.880、0.906、-0.961,P均<0.05.结论 调节PTHrP、MCT1信号通路可以影响肺腺癌细胞衰老.其机制可能是由于PTHrP信号通路和MCT1信号通路相互影响,共同调节肺腺癌细胞的乳酸转运.

关键词：肺腺癌、甲状旁腺激素相关蛋白、单羧酸转运泵家族1、细胞衰老、β-半乳糖苷酶、细胞内pH值、乳酸

所属期刊栏目：57

分类号：R734.2(肿瘤学)

在线出版日期：2017-07-14（万方平台首次上网日期，不代表论文的发表时间）

页数：共4页

页码：4-7