浆细胞瘤异位基因1表达下调对高糖环境下肾小球系膜细胞增殖的影响及机制

摘要：

目的 观察长链非编码RNA(lncRNA)中的浆细胞瘤异位基因1(PVT1)表达下调对高糖环境下肾小球系膜细胞增殖及细胞外基质(ECM)相关蛋白表达的影响,探讨PVT1在糖尿病肾病发病中的作用机制.方法 培养人肾小球系膜细胞,分为正常对照组、高糖组、高糖+control siRNA组、高糖+PVT1 siRNA组.正常对照组在5.55 mmol/L的低糖DMEM完全培养基中培养,高糖组、高糖+control siRNA组、高糖+PVT1 siRNA组均在25 mmol/L的高糖DMEM完全培养基中培养.高糖+control siRNA组、高糖+PVT1 siRNA组分别转染control siRNA、PVT1 siRNA.分别培养0、24、48、72 h后,采用CCK-8法测算各组细胞增殖率.采用流式细胞术检测各组细胞G1、S期比例.采用qRT-PCR法检测各组细胞PVT1 mRNA表达.采用Western blot法检测各组细胞ECM相关蛋白纤维连接蛋白(FN)、转化生长因子β1(TGF-β1)及Ⅰ型纤溶酶原激活物抑制因子(PAT-1)蛋白的表达.结果 高糖组细胞各时间点细胞增殖率均高于正常对照组,高糖+PVT1 siRNA组各时间点细胞增殖率均低于高糖组(P均<0.05).与正常对照组比较,高糖组细胞G1期比例减少、S期比例增多;与高糖组比较,高糖+ PVT1 siRNA组G1比例增加、S期比例减少(P均<0.05).高糖组、高糖+control siRNA组PVT1 mRNA相对表达量均高于正常对照组,高糖+PVT1 siRNA组PVT1 mRNA相对表达量低于高糖组(P均<0.05).高糖组、高糖+control siRNA组、高糖+PVT1 siRNA组FN、TGF-β1、PAT-1蛋白表达均高于正常对照组,高糖+PVT1 siRNA组FN、TGF-β1、PAT-1蛋白表达均低于高糖组(P均<0.05).结论 在高糖环境下,肾小球系膜细胞中PVT1表达明显增加,下调PVT1表达可明显抑制肾小球系膜细胞的增殖、抑制ECM相关蛋白的表达.

关键词：长链非编码RNA、浆细胞瘤异位基因1、肾小球系膜细胞、高糖、细胞外基质、糖尿病肾病

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分类号：R692.6(泌尿科学（泌尿生殖系疾病）)

资助基金：广东省省级科技计划资助项目2014A020212324

在线出版日期：2017-05-16（万方平台首次上网日期，不代表论文的发表时间）

页数：共4页

页码：10-13