氟及7-NI共培养的SH-SY5Y细胞nNOS表达、增殖情况观察
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10.3969/j.issn.1002-266X.2017.11.007

氟及7-NI共培养的SH-SY5Y细胞nNOS表达、增殖情况观察

引用
目的 观察氟及神经型一氧化氮合成酶(nNOS)特异性抑制剂7-硝基吲唑(7-NI)共培养的SH-SY5Y细胞增殖情况和nNOS表达变化.方法 将体外培养SH-SY5Y细胞分为对照组、低氟组、高氟组、7-NI组、低氟+7-NI组、高氟+7-NI组,每组6个复孔.低氟组加入0.2 mmol/L NaF,高氟组加入2.0 mmol/L NaF,7-NI组加入1 μmol/L 7-NI,低氟+7-NI组加入0.2 mmol/L NaF和1μmol/L 7-NI,高氟+7-NI组加入2.0 mmol/L NaF和1 μmol/L 7-NI,对照组加入等体积培养液,继续培养24 h.采用CCK-8法检测各组SH-SY5Y细胞增殖情况(以OD450表示);采用实时荧光定量 PCR 法检测各组SH-SY5Y细胞NOS mRNA;采用Western blotting法检测各组SH-SY5Y细胞NOS 蛋白.结果 低氟组、高氟组细胞OD450均低于对照组(P均<0.05),且高氟组细胞OD450低于低氟组(P<0.05);7-NI组细胞OD450与对照组相比P>0.05;低氟+7-NI组细胞OD450高于低氟组(P<0.05);高氟+7-NI组细胞OD450高于高氟组(P<0.05).低氟组、高氟组细胞nNOS mRNA和蛋白相对表达量均高于对照组(P均<0.05),且高氟组细胞nNOS mRNA和蛋白相对表达量均高于低氟组(P均<0.05);7-NI组细胞nNOS mRNA和蛋白相对表达量均低于对照组(P均<0.05);低氟+7-NI组细胞nNOS mRNA和蛋白相对表达量均低于低氟组(P<0.05);高氟+7-NI组细胞nNOS mRNA和蛋白相对表达量均低于高氟组(P<0.05).结论 氟可以抑制SH-SY5Y细胞增殖,7-NI共培养可以减轻氟对SH-SY5Y细胞的增殖抑制作用.

氟、氟中毒、人神经母细胞瘤细胞、7-硝基吲唑、神经型一氧化氮合成酶、一氧化氮

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R995;R977.3;R994.6(毒物学(毒理学))

国家自然科学基金资助项目81460482;教育部博士学科点专项科研基金资助项目20115215120003

2017-04-21(万方平台首次上网日期,不代表论文的发表时间)

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1002-266X

37-1156/R

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2017,57(11)

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