成年小鼠心脏c-kit+干细胞的分离及诱导分化

摘要：

目的 从成年小鼠心脏中分离、纯化c-kit+干细胞,并观察其诱导分化结果.方法 取C57BL/6雄性小鼠3只,取心脏组织,将心脏解离成单个细胞.采用CD45磁珠、c-kit磁珠分选得到c-kit+干细胞.鉴定细胞纯度,观察细胞表型.观察所得心脏c-kit+干细胞球的形成情况,对其进行诱导分化,采用RT-PCR法观察诱导分化细胞血管平滑肌细胞的标志物α-SMA和sm-22α、血管内皮细胞标志物vWF、心肌细胞标志物cTnT、心脏干细胞标志物c-kit,观察诱导分化的细胞表型.结果 心脏c-kit+干细胞c-kit+纯度为89.3％,心脏干细胞表面表达c-kit抗体.原代c-kit+干细胞生长缓慢,传代后细胞生长较快,悬浮培养可形成心脏c-kit+干细胞球.与诱导第0天比较,诱导分化第14 d时心脏干细胞α-SMA、sm-22α、vWF、cTnT mRNA相对表达量升高,c-kit mRNA相对表达量降低,P均＜0.05.心脏c-kit+干细胞在心肌细胞诱导分化培养基中培养14 d左右可见cTnT阳性细胞.心脏干细胞在无LIF的培养基中培养14天可见vWF、α-SMA阳性细胞.结论 成功从成年小鼠心脏分离心脏c-kit+干细胞,所得c-kit+干细胞c-kit+纯度高,可成功诱导分化为心肌细胞、血管平滑肌细胞及血管内皮细胞.

关键词：心脏干细胞、c-kit+干细胞、干细胞移植、缺血性心脏病

所属期刊栏目：57

分类号：R541.75(心脏、血管（循环系）疾病)

资助基金：上海市科学技术委员会资助项目134119a5602

在线出版日期：2017-05-26（万方平台首次上网日期，不代表论文的发表时间）

页数：共4页

页码：16-19