miR-497-5p对人宫颈癌细胞增殖的抑制作用及机制

摘要：

目的 探讨miR-497-5p对人宫颈癌细胞(HeLa)增殖的抑制作用及机制.方法 将对数生长期人宫颈癌HeLa细胞随机分为两部分,第一部分细胞随机分为四组:miR-497-5p mimics NC+IKCa13′端非翻译区(3′-URT)野生型双荧光素酶重组质粒载体(IKCa1-wt)转染组、miR-497-5p mimics+IKCa1-wt转染组、miR-497-5p mimics NC+3′-URT突变型双荧光素酶重组质粒载体(IKCa1-mut)转染组、miR-497-5p mimics+IKCa1-mut转染组,分别转染相应质粒48 h,用双荧光素酶报告基因检测系统检测HeLa细胞荧光素酶活性.第二部分细胞随机分为三组:miR-497-5p mimics转染组、miR-497-5p mimics NC转染组和空白对照组,分别转染相应质粒,用qRT-PCR技术检测细胞IKCa1 mRNA表达,Western boltting法检测细胞IKCa1蛋白表达,CCK-8法检测细胞增殖能力.结果 第一部分细胞中的miR-497-5p mimics+IKCa1-wt转染组荧光素酶活性较其他三组降低(P均<0.05),其他三组间比较差异无统计学意义(P均>0.05),证实miR-497-5p与IKCa13′-URT存在特异性结合位点.第二部分细胞中的miR-497-5p mimics转染组IKCa1 mRNA、蛋白的相对表达量较其他两组降低(P均<0.05),其他两组比较差异无统计学意义(P均>0.05).第二部分细胞培养24、48、72、96 h,miR-497-5p mimics转染组增殖能力均较其他两组降低(P均<0.05),其他两组比较差异无统计学意义(P均>0.05).结论 miR-497-5p可以通过负向调控IKCa1基因表达以抑制宫颈癌细胞增殖.

关键词：子宫颈癌、微小RNA-497-5p、中电导钙激活性钾离子通道、IKCa1基因、HeLa细胞、细胞增殖

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分类号：R737.33(肿瘤学)

资助基金：四川省卫生厅科研基金资助项目110373;四川省沪州市科技局科研项目2013LZLY-J30

在线出版日期：2017-03-23（万方平台首次上网日期，不代表论文的发表时间）

页数：共4页

页码：15-18