人 Tudor-SN UTR 片段荧光素酶报告基因表达质粒的构建及活性检测

摘要：

目的：为深入研究Tudor-SN蛋白本身在翻译水平的调控机制奠定基础。方法以HeLa细胞全基因组DNA为模板，PCR扩增出目的基因，利用双酶切的方法将目的片段连接到pGL3-Control载体上。再将构建成功的pGL3-5′UTR、pGL3-3′UTR重组质粒分别与内参海肾荧光素酶质粒瞬时共转染HeLa细胞，培养48 h检测荧光素酶的活性。结果双酶切和基因测序法鉴定重组质粒构建成功，转染重组质粒后可检测到荧光素酶的活性；以pGL3-5′UTR质粒荧光素酶活性最高。结论成功构建了人Tudor-SN基因5′UTR和3′UTR序列的重组质粒，为研究Tu-dor-SN基因UTR区对翻译调控的影响奠定了基础。

关键词：人Tudor-SN蛋白、5′UTR、3′UTR、重组质粒、荧光素酶

所属期刊栏目：57

分类号：Q591.2;Q784

资助基金：国家杰出青年基金资助项目31125012；教育部“创新团队发展计划” IRT13085；国家自然科学基金资助项目31170830／31370749／31571380；天津市应用基础与前沿技术研究计划青年基金项目15JCQNJC09900；天津医科大学青年基金项目2015KYZQ03。

在线出版日期：2017-03-08（万方平台首次上网日期，不代表论文的发表时间）

页数：共4页

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