冷诱导 RNA 结合蛋白表达在颅脑损伤大鼠亚低温治疗中的作用及机制

摘要：

目的：探讨冷诱导 RNA 结合蛋白（CIRP）表达在颅脑损伤（TBI）大鼠亚低温（MH）治疗过程中的作用，并分析其机制。方法将大鼠随机分为 A、B、C 组，分别一次性鞘内注射0．1 mL 生理盐水、空白 AD5-GFP、AD5-GFP-CIRP-siRNA；每组再分为4个亚组，即假手术组（Sham 组）、TBI 组、MH 组、TBI ＋MH 组。TBI、TBI ＋MH 组采用液压打击装置进行 TBI 造模，Sham 组及 MH 组不予打击；TBI 造模成功后，MH 组、TBI ＋MH 组行 MH 治疗48 h。于 MH 开始治疗后30 min 及6、12、24、48、72 h，采用 Western blot 法检测下丘脑部位 CIRP、Ras、Raf、ERK-1／2、p-ERK-1／2蛋白；MH 开始治疗后96 h 取大鼠脑皮层、海马、下丘脑部位脑组织，采用 TUNEL 法检测凋亡脑细胞、RT-PCR 法检测 CIRP mRNA。结果 A、B、C 组中，TBI、TBI ＋MH 组皮层、海马、下丘脑部位神经细胞凋亡指数均较Sham、MH 组升高（P 均＜0．05）；A、B 组中，TBI ＋MH 组各部位神经细胞凋亡指数较 TBI 组降低（P 均＜0．05），且该组下丘脑部位较皮层、海马区神经细胞凋亡指数下降明显（P 均＜0．05）；在 C 组中，TBI ＋MH 组各部位神经细胞凋亡指数较 TBI 组无差异（P 均>0．05）。在 A、B 组中，MH、TBI ＋MH 组各部位 CIRP mRNA 较 Sham 组升高（P 均＜0．05），下丘脑部位较皮层、海马区 CIRP mRNA 表达升高（P 均＜0．05）；而在 C 组中，TBI、MH、TBI ＋MH 组各部位 CIRP mRNA 较 Sham 组均无差异（P 均>0．05），各部位 CIRP mRNA 表达无差异（P 均>0．05）。在 A、B 组中， TBI 组 CIRP 蛋白自创伤后12、24 h 较创伤后30 min 升高（P 均＜0．05），随后开始下降，在48、72 h 无差异（P 均＞0．05）；MH、TBI ＋MH 组 CIRP 蛋白表达自 MH 开始后6 h 升高（P 均＜0．05），于48 h 达高峰，72 h 呈下降趋势；在C 组中，各组 CIRP 蛋白表达均无差异（P 均＞0．05）。TBI、MH、TBI ＋MH 组 Ras 激活度（Ras／Raf 值）均进行性升高，于24 h 达到峰值，随后进行性下降；MH、TBI ＋MH 组可导致 ERK-1／2激活度（p-ERK-1／2／ERK-1／2值）峰值前移，并迅速降低其激活度，而 C 组中 MH、TBI ＋MH 组此作用消失。结论在 MH 治疗 TBI 过程中，CIRP 因低温作用而在皮层、海马、下丘脑部位过表达，其中下丘脑部位更加明显；CIRP 作用机制可能通过直接调控 ERK-1／2激活，使其激活度随时间推移迅速降低，减少对应部位脑组织细胞凋亡，从而发挥神经保护作用。

关键词：颅脑损伤、冷诱导RN A结合蛋白、亚低温、细胞凋亡、细胞外调节蛋白激酶

所属期刊栏目：56

分类号：R651.1(外科学各论)

资助基金：国家自然科学基金资助项目81303091。

在线出版日期：2016-11-30（万方平台首次上网日期，不代表论文的发表时间）

页数：共5页

页码：9-13