RNAi沉默 Rac1基因对结肠癌细胞增殖及裸鼠成瘤的影响

摘要：

目的：探讨RNAi沉默Rac1基因对结肠癌细胞增殖及裸鼠成瘤的影响。方法①细胞实验：体外培养结肠癌细胞SW480，随机分为空白对照组、阴性对照组、shRNA-Rac1组，阴性对照组、shRNA-Rac1组分别转染空载质粒慢病毒、shRNA-Rac1慢病毒。采用RT-PCR技术、Western blotting法检测各组Rac1 mRNA及其蛋白表达；采用MTT法检测各组转染24、48、72、96 h的细胞增殖情况。②动物实验：取shRNA-Rac1组、阴性对照组转染后细胞分别接种于裸鼠皮下，建立结肠癌裸鼠移植瘤模型（分别记为观察组、对照组），观察裸鼠成瘤及移植瘤生长情况，喂养35天脱臼处死，完整剥离肿瘤组织，称取瘤体质量并测量肿瘤体积。同时检测瘤体 Rac1蛋白表达情况。结果①细胞实验：与阴性对照组比较，shRNA-Rac1组Rac1 mRNA及其蛋白表达明显降低（P均＜0．05）；与阴性对照组比较，shRNA-Rac1组各时间点细胞增殖速度明显降低（P均＜0．05）。②动物实验：对照组癌细胞接种4～8天均可见瘤体形成，观察组接种35天仅2只成瘤，且瘤体形成时间较对照组晚10天。接种35天，观察组、对照组瘤体体积分别为（32．54±43．13）、（948．13±523．50）mm3，瘤体质量分别为（0．023±0．031）、（0．873±0．372）g，两组比较P均＜0．01。与对照组比较，观察组瘤体组织Rac1蛋白阳性表达率明显降低（ P＜0．05）。结论抑制Rac1表达能降低结肠癌细胞增殖速度，抑制裸鼠移植瘤生长。

关键词：结肠癌、Rac1、RNA干扰、裸鼠成瘤、细胞增殖

所属期刊栏目：56

分类号：R735.3(肿瘤学)

资助基金：国家自然科学基金资助项目81260321。

在线出版日期：2016-11-10（万方平台首次上网日期，不代表论文的发表时间）

页数：共4页

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