缺血再灌注对大鼠心肌H9 c2细胞活性、凋亡的影响及其机制

摘要：

目的：观察缺血再灌注对大鼠H9 c2心肌细胞活性、凋亡的影响，并探讨其作用机制。方法 H9 c2细胞分为A、B组，1×104／孔接种于96孔板，每组6个复孔。细胞贴壁生长24 h时B组吸弃原培养基，加入人工缺氧液100μL，置于含94％ N2、1％ O2、5％ CO2的三气培养箱中培养90 min；吸弃缺氧液，加入DMEM高糖培养基，置于正常培养箱中培养90 min备用。A组仅加入DMEM高糖培养基，置于正常培养箱中培养90 min备用。采用MTT法检测细胞活性，TUNEL法检测凋亡细胞，采用激光共聚焦显微镜观察并计算两组细胞活性氧簇（ROS）含量及线粒体膜电位（MMP），采用Western blotting法检测心肌细胞热休克蛋白60（HSP60）、过氧化物氧化还原酶（Prx）、硫氧还原蛋白（Trx）、线粒体分裂蛋白（Fis1）。结果 A、B组心肌细胞活性分别为0．77±0．01、0．40±0．02，二者比较，P＜0．05。A、B组心肌细胞凋亡率分别为2．24％±0．12％、41．78％±1．43％，二者比较，P＜0．05。A组细胞ROS含量及MMP分别为0．58％±0．02％、1．12％±0．05％，B组分别为1．13％±0．05％、0．76％±0．01％，组间比较，P均＜0．05。与B组相比，A组心肌细胞HSP60、Fis1蛋白表达升高，Prx2、Trx1蛋白表达降低，P均＜0．05。结论缺血再灌注后H9c2细胞出现细胞活性下降、细胞凋亡，其机制可能与缺血再灌注促进细胞HSP60、Fis1蛋白表达，抑制Prx2、Trx1蛋白表达有关。

关键词：缺血再灌注、H9 c2心肌细胞、细胞活性、细胞凋亡、活性氧簇、线粒体膜电位、热休克蛋白60、过氧化物氧化还原酶、硫氧还原蛋白、线粒体分裂蛋白

所属期刊栏目：56

分类号：R965(药理学)

资助基金：华南理工大学自然科学基金资助项目D2154630。

在线出版日期：2016-11-30（万方平台首次上网日期，不代表论文的发表时间）

页数：共4页

页码：16-19