耐药人胃癌细胞U HRF 1基因的表达变化及其与多药耐药的关系

摘要：

目的：观察耐药人胃癌细胞泛素样含PHD和环指域1（UHRF1）基因的表达变化，并探讨其与胃癌细胞多药耐药的关系。方法取对数生长期人胃癌细胞SGC7901、耐长春新碱（VCR）的SGC7901（SGC7901／VCR）、耐阿霉素（ADR）的SGC7901（SGC7901／ADR），采用实时定量PCR法检测各细胞UHRF1 mRNA，采用Western blotting法检测各细胞UHRF1蛋白。取对数生长期SGC7901／VCR、SGC7901／ADR细胞分别转染抑制UHRF1表达的小干扰RNA（siUHRF1）（SGC7901／VCR-siUHRF1、SGC7901／ADR-siUHRF1）、无意义空白质粒（SGC7901／VCR-UHRF1、SGC7901／ADR-UHRF1），另设空白对照，不做任何处理。取对数生长期SGC7901细胞，分别转染过表达的UHRF1质粒（SGC7901-UHRF1）、无意义空白质粒（SGC7901-NC），另设空白对照。转染48 h 收集以上细胞备用。采用MTT法检测SGC7901／VCR、SGC7901／ADR细胞各干扰组和SGC7901细胞各干扰组对化疗药物[（VCR、ADR、5-氟尿嘧啶（5-FU）和顺氨氯铂（CDDP）]的药物敏感性，计算半数抑制浓度（IC50）；取SGC7901／VCR、SGC7901／ADR细胞各干扰组和SGC7901空白对照，加入5-FU共培养，采用流式细胞仪观察细胞凋亡情况。结果 SGC7901细胞UHRF1 mRNA及蛋白的相对表达量均低于SGC7901／VCR、SGC7901／ADR细胞，P均＜0．05。促进UHRF1表达可升高SGC7901细胞对VCR、ADR、5-FU、CDDP 的IC50，降低细胞凋亡率，P均＜0．05。抑制UHRF1表达可降低VCR、ADR、5-FU、CDDP对SGC7901／VCR和SGC7901／ADR细胞的IC50，升高细胞凋亡率，P均＜0．05。结论耐药人胃癌细胞中存在UHRF1高表达。UHRF1高表达可降低胃癌细胞的药物敏感性、提高细胞多药耐药性，可能与UHRF1抑制胃癌细胞凋亡有关。

关键词：胃癌、泛素样含PHD和环指域1、多药耐药、药物敏感性、半数抑制浓度、细胞凋亡

所属期刊栏目：56

分类号：R735.2(肿瘤学)

资助基金：国家自然科学基金资助项目81402337。

在线出版日期：2016-11-30（万方平台首次上网日期，不代表论文的发表时间）

页数：共4页

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