miRNA-21对脂多糖诱导大鼠心肌细胞增殖的影响及其机制探讨

摘要：

目的 观察微小RNA-21(miRNA-21)对脂多糖(LPS)诱导的大鼠心肌细胞增殖的影响,并探讨其可能机制.方法 取大鼠心肌细胞H9C2,用LPS 10 μg/mL处理0、6、12 h,RT-PCR法检测细胞miRNA-21表达.将对数生长期的H9C2细胞随机分为4组,A组不处理,B组用LPS 10 μg/mL处理12 h;C、D组分别转染对照质粒(NC-miRNA片段)、miRNA-21抑制质粒(miRNA-21 antagomiR),培养48 h后再用LPS 10 μg/mL处理12 h.采用CCK-8法检测各组H9C2细胞增殖的OD值,Western blot法检测H9C2细胞中Bax、Bcl-2蛋白,分光光度法检测H9C2细胞中Caspase-3活性.结果 LPS处理0、6、12 h时,H9C2细胞miRNA-21相对表达量分别为1.05 ±0.03、12.95±0.08、19.62±0.12;与0h时比较,6、12 h时H9C2细胞miRNA-21相对表达量升高(P均＜0.01).A、B、C、D组H9C2细胞增殖的OD值分别为1.08±0.03、0.71 ±0.03、0.70±0.01、0.85±0.02,A组＞D组＞B、C组,P均＜0.01.与A组比较,B、C、D组H9C2细胞中Bax相对表达量增加、Bcl-2相对表达量降低(P均＜0.01);与B、C组比较,D组H9C2细胞中Bax相对表达量减少、Bcl-2相对表达量增加(P均＜0.01).B、C、D组H9C2细胞Caspase-3活性分别为1.13 ±0.08、1.10±0.14、0.57±0.06,D组H9C2细胞Caspase-3活性低于B、C组,P均＜0.01.结论 LPS可致心肌细胞损害过程miRNA-21表达增加,抑制miRNA-21表达可减轻LPS对心肌细胞增殖的抑制作用;其机制为抑制miRNA-21表达可下调Bax蛋白、上调Bcl-2蛋白表达,抑制Caspase-3活性,从而减轻细胞凋亡.

关键词：微小核糖核酸21、脂多糖、心肌细胞、细胞增殖、凋亡相关蛋白、脓毒血症、大鼠

所属期刊栏目：56

分类号：R459.7(治疗学)

资助基金：上海交通大学医学院课题项目JY2011A10;上海市长宁区卫生局资助项目20104Y01001

在线出版日期：2016-11-10（万方平台首次上网日期，不代表论文的发表时间）

页数：共3页

页码：29-31