UBE2C基因沉默对膀胱癌5637细胞增殖、侵袭能力的影响及其机制

摘要：

目的 探讨人类泛素偶联酶E2C(UBE2C)基因沉默对膀胱癌5637细胞增殖和侵袭能力的影响及作用机制.方法 将对数生长期的膀胱癌5637细胞随机分为5组,其中UBE2C siRNA1、2、3组及阴性对照组分别采用瞬时转染法转染3条UBE2C小干扰RNA(UBE2C siRNA1、2、3)和阴性对照-siRNA,空白对照组不进行转染.采用RT-PCR法和Western blotting法检测各组UBE2C mRNA及蛋白相对表达量,UBE2C siRNA1、2、3组细胞UBE2CmRNA及蛋白相对表达量均低于阴性对照组、空白对照组,UBE2C siRNA2组明显低于UBE2C siRNA1、3组(P均＜0.05);证实UBE2C siRNA2组沉默效果最好.收集UBE2C siRNA2组和阴性对照组、空白对照组细胞,采用MTT法检测培养0、24、48、72、96 h的细胞增殖能力(以OD490表示),Transwell侵袭实验检测侵袭能力(以穿过小室膜的细胞数表示),Western blotting法检测细胞外调节蛋白激酶B(Akt)和磷酸化Akt (p-Akt)蛋白相对表达量.结果 随着培养时间的延长,UBE2C siRNA2组、阴性对照组和空白对照组OD490呈升高趋势;UBE2C siRNA2组培养48、72、96 h的0D490均明显低于阴性对照组和空白对照组(P均＜0.01).UBE2C siRNA2组、阴性对照组和空白对照组穿过小室膜的细胞数分别为(58.3±2.2)、(129.3±3.1)、(162.7±5.1)个,组间两两比较P均＜0.01.三组细胞Akt蛋白相对表达量比较差异均无统计学意义(P均＞0.05),UBE2C siRNA2组p-Akt蛋白相对表达量低于阴性对照组和空白对照组(P均＜0.01).结论 UBE2C基因沉默后膀胱癌5637细胞增殖和侵袭能力降低,抑制Akt信号转导通路可能是其作用机制.

关键词：膀胱癌、人类泛素偶联酶E2C、细胞增殖、侵袭、细胞外调节蛋白激酶B

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分类号：R737.14(肿瘤学)

资助基金：国家自然科学基金面上项目81272823;河南省教育厅科技创新团队支持计划14IRTSTHN020

在线出版日期：2016-11-30（万方平台首次上网日期，不代表论文的发表时间）

页数：共4页

页码：23-26