高原红细胞增多症大鼠骨髓CD71+细胞EpoR表达、分布变化及意义

摘要：

目的 观察高原红细胞增多症(HAPC)大鼠骨髓CD71+细胞促红细胞生成素受体(EpoR)表达及分布变化,并探讨其意义.方法 将48只雄性SD大鼠随机分为HAPC组和对照组,每组24只.HAPC组和对照组分别在海拔4 300、2 250 m自然环境下饲养.饲养40天行血液学参数[RBC、Hb、红细胞压积(HCT)、动脉血氧饱和度(SaO2)]和骨髓细胞分类计数检测,HAPC组RBC、Hb、HCT及红系细胞数量、中幼红细胞数量、晚幼红细胞数量均高于对照组,Sa02低于对照组(P均＜0.05),证实HAPC模型制备成功.两组均采用密度梯度离心法制备骨髓单个核细胞(MNC)悬液,CCK8法检测MNC增殖能力(以OD450表示),单层半固体培养法检测红系集落形成单位(CFU-E)数量.采用免疫磁珠分选法从两组MNC悬液中分选CD71+细胞,免疫荧光法观察细胞膜表面EpoR荧光情况,ELISA法检测细胞膜和细胞质EpoR表达,Real-time PCR法和Western blotting法检测EpoR mRNA和蛋白相对表达量.结果 HAPC组和对照组OD4.50分别为1.54±0.04、1.17±0.05,CFU-E数量分别为(61.25±6.84)、(12.90±4.39)个;两组比较P均＜0.01.免疫荧光显微镜下可见两组细胞膜表面均有环形或半环形的绿色荧光,但HAPC组细胞膜表面EpoR荧光强度和表达EpoR荧光的细胞数量均高于对照组.HAPC组及对照组CD71+细胞膜EpoR表达分别为2.41±0.03、1.55±0.06(P ＜0.05);细胞质EpoR表达分别为96.39±0.42、94.49±0.65(P＞0.05).HAPC组CD71+细胞EpoR mRNA和蛋白相对表达量均高于对照组(P均＜0.05).结论 HAPC大鼠骨髓CD71+细胞EpoR表达升高,分布多集中于细胞膜表面;上述变化可能通过促进MNC及骨髓红系细胞增殖而参与HAPC的发生、发展.

关键词：高原红细胞增多症、CD71+细胞、促红细胞生成素受体、大鼠

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分类号：R555.1(血液及淋巴系疾病)

资助基金：国家自然科学基金资助项目81441116;青海省科技厅应用基础研究计划项目2012-Z-729;青海大学“123高层次人才培养工程”中青年学术带头人基金;青海大学医学院中青年科研基金团队项目2014-KT-1

在线出版日期：2016-11-30（万方平台首次上网日期，不代表论文的发表时间）

页数：共4页

页码：15-18